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原发性胆汁性肝硬化PDC-E2特异性T细胞拮抗性模拟肽的筛选
目的筛选可拮抗原发性胆汁性肝硬化(PBC)中PDC-E2165-174特异性CTL功能的模拟肽.方法以自身抗原表位PDC-E2165-174(LLAEIETDKA)为原型肽,采用丙氨酸突变扫描法,通过亲和力分析及其对PDC-E2165-174特异性CTL细胞毒性和分泌细胞因子等功能的抑制效应,从中筛选拮抗性模拟肽.结果8条模拟肽中,5号位突变的模拟肽(I5A)显示与HLA-A*0201分子高亲和力,5名PBC患者PDC-E2特异性CTL对其负载的T2细胞的杀伤率均小于10%,并且I5A也未能诱导PBC患者PDC-E2特异性CTL产生IFN-γ.在原型肽的存在下,I5A可抑制PDC-E2165-174 CTL细胞毒性和分泌IFN-γ,随着模拟肽浓度增加,抑制效应越强,在10 μmol/L浓度时可以明显抑制PDC-E2165-174 CTL的细胞毒活性和分泌IFN-γ的能力.结论模拟肽I5A(LIAEAETDKA)可能是PDC-E2165-174特异性CTL的一个拮抗性多肽,其抑制效应并不是其能竞争结合靶细胞上的HLA-A*6201分子,而是对TCR的一种拮抗作用,为将来设计以TCR为基础的特异性免疫治疗提供实验依据.
关键词： 原发性胆汁性肝硬化 PDC-E2特异性CTL 拮抗作用 模拟肽 -
原发性胆汁性肝硬化HLA-A*0201限制性PDC-E2特异性CTL功能分析
目的:探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)中HLA-A*0201限制的PDC-E2159-167特异性CTL与PDC-E2165-174特异性CTL功能.方法:分析15例HLA-A*0201阳性(A2+)PBC患者抗原肽PDC-E2159-167、PDC-E2165-174诱导的CTL对以表达HLA-A*0201分子的T2细胞作为靶细胞的细胞毒性作用,并利用四聚体技术结合细胞内因子染色研究PDC-E2159-167特异性CTL与PDC-E2165-174特异性CTL分泌细胞因子(IFN-γ、IL-4和TNF-α)情况.结果:15例A2+PBC患者中,12例PDC-E2159-167诱导的CTL和10例PDC-E2165-174诱导的CTL对负载相应抗原肽的靶细胞特异杀伤活性大于10%(E:T=40:1),而对照组则均小于10%;15例A2+PBC患者从PBMC诱导的PDC-E2159-167特异性CTL和PDC-E2165-174特异性CTL中分泌IFN-γ细胞比值分别为0.33%±0.24%(0%～0.86%)、0.27%±0.24%(0%～0.75%),未检测到分泌TNF-α或IL-4的PDC-E2159-167或PDC-E2165-174特异性CTL.结论:结果表明,大部分PBC患者中HLA-A*0201限制性PDC-E2159-167特异性CTL和PDC-E2165-174特异性CTL具有特异杀伤活性,HLA-A*0201限制性PDC-E2特异性CTL主要分泌IFN-γ并非IL-4、TNF-α.
关键词： 原发性胆汁性肝硬化 PDC-E2特异性CTL 四聚体 细胞因子
