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双价痢疾工程疫苗经粘膜免疫动物的实验研究
目的探讨不同粘膜免疫途径对2株痢疾工程疫苗免疫效果的影响. 方法用FSM-2117或FS-5416以4×107CFU/只分别经滴鼻、灌胃和小肠内免疫小鼠,3次免疫后7?d分离小鼠脾、派伊尔结(PP)、肠系膜中心淋巴结(MLN)、小肠淋巴细胞固有层(LPL)、鼻通道(NP)及NALT淋巴细胞,用BA-ELISASPOT法检测其特异性抗FSM-2117或FS-5416全菌抗原的IgA、IgG-ASC(抗体分泌细胞)数量. 结果 2株疫苗经鼻内免疫都诱发了鼻粘膜相关淋巴组织、胃肠粘膜相关淋巴组织以及代表系统免疫反应的脾淋巴细胞全菌抗原特异性IgA、IgG-ASC的显著增加(P＜0.05和0.01).小肠内免疫后,可有效诱发肠粘膜局部以及脾淋巴细胞全菌抗原特异性IgA、IgG-ASC的显著增加(P＜0.01),但不能刺激鼻粘膜局部淋巴细胞的特异性ASC反应. 结论 2株疫苗经鼻粘膜免疫均可诱导NALT和GALT及系统免疫反应的发生,是一个可行的免疫途径.
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免疫途径及侵袭蛋白表达对痢疾疫苗免疫效果影响的实验研究
目的探讨免疫途径及侵袭蛋白表达对2株痢疾疫苗免疫效果的影响. 方法 FSM-2117或FS-5416以4×107CFU/只分别经滴鼻、灌胃、肠内注射3种途径免疫小鼠,三免后7?d收集血清、小肠、鼻咽、肺、阴道冲洗液,ELISA法检测其中特异性福氏、宋内LPS IgA和IgG抗体(Ab)水平. 结果滴鼻和肠内免疫都能够诱生血清中双价IgA、IgG Ab显著升高,但仅滴鼻免疫组Ipa+株较Ipa-株升高显著(P＜0.01).滴鼻免疫组同时诱生鼻咽、肺、小肠内特异性抗体升高,尤其是生殖道冲洗液内抗体升高极为明显;而肠内免疫组诱生小肠、肺冲洗液内特异性抗体升高,但鼻咽及生殖道冲洗液内抗体未见明显升高. 结论鼻粘膜免疫不仅诱导多个粘膜部位(特别是生殖道)的抗体反应,且能诱导系统免疫反应.是一个安全有效的免疫途径.研究中发现侵袭蛋白表达在鼻粘膜部位能够显著加强系统特异性抗体生成,但在胃肠粘膜却无此作用.
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甲型肝炎减毒活疫苗及灭活疫苗灌胃免疫小鼠后的抗体应答
目的:测定甲肝减毒活疫苗及灭活疫苗灌胃免疫小鼠后的抗体应答效应.方法:将活或灭活的甲肝疫苗加或不加明胶,经胃免疫小鼠,于末次免疫后2 w取血清及肠液,用间接ELISA法分别检测其中的特异性IgG和IgA抗体水平,并与空白及肌注组比较.结果:实验组特异抗体水平明显高于肌注组(P＜0.01);加明胶组的免疫效果较不加者好(IgG:P＜0.001,IgA:P＜0.05).结论:甲肝活疫苗及灭活疫苗经消化道免疫小鼠后,均可诱导全身及局部的抗体应答;明胶有增强抗体产生的作用,可作为一种安全、廉价的粘膜佐剂被进一步开发与利用.
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空肠弯曲菌口服全菌佐剂疫苗研究
目的采用明胶为空肠弯曲菌死疫苗的佐剂,灌胃免疫小鼠,评价佐剂全菌死疫苗的免疫原性.方法采用空肠弯曲菌全菌死疫苗肌肉注射(A组),用明胶为佐剂全菌死疫苗(B组),全菌死疫苗(C组)及PBS(正常对照组)灌胃免疫Balb/c小鼠;接种3次,间隔7 d,末次接种1周后收集小鼠血清和小肠粘液.采用ELISA间接法检测各组血清抗体IgG、IgA、IgM和肠道粘液抗体SIgA水平.结果 A、B、C组血清抗体IgG、IgA、IgM和肠道粘液抗体SIgA水平均高于正常对照组,B组明显高于C组有统计学差异(P<0.05),A组与B组间没有统计学差异(P>0.05).结论明胶作佐剂的全菌死疫苗口服具有良好的免疫原性,可作为口服疫苗佐剂后选.
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EHF疫苗不同途径免疫后血清及黏膜抗体应答情况
目的探讨EHF疫苗经不同剂量和途径免疫后血清IgG及黏膜IgA产生情况,以探讨合适的免疫剂量和接种途径.方法以不同剂量EHF双价灭活疫苗分别经皮下和灌胃免疫小鼠,共3次(第0、5、10天),末次接种后5 d收集血清和小肠冲洗液,用间接免疫荧光法(IFA)检测血清EHF IgG抗体和小肠冲洗液IgA抗体.结果皮下注射能诱导血清特异性IgG和黏膜IgA的产生,灌胃免疫未见抗体产生,1.4 TCID50的EHF疫苗剂量在皮下注射组血清IgG和小肠冲洗液IgA有100%阳性率.结论 EHF疫苗皮下注射能诱导血清特异性IgG和黏膜IgA的产生,1.4 TCID50的剂量为较佳剂量.
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空肠弯曲菌口服全菌佐剂疫苗的初步研究
目的本研究采用明胶为空肠弯曲菌菌苗的佐剂,灌胃免疫小鼠,评价佐剂全菌苗的免疫原性.方法采用明胶为佐剂的全菌疫苗灌胃免疫Balb/c小鼠.加明胶为佐剂全菌疫苗灌胃免疫Balb/c小鼠为实验组,全菌疫苗肌注和全菌疫苗灌胃免疫为实验对照组,PBS灌胃免疫为正常对照组,未作任何处理的Balb/c小鼠为阴性对照组;接种3次,间隔7d,末次接种1wk后收集小鼠血清和小肠粘液.采用ELISA间接法检测血清抗体IgG、IgA、IgM和肠道粘液抗体SIgA水平.结果各组血清抗体IgG、IgA、IgM和肠道粘液抗体SIgA水平,加佐剂组明显高于未加佐剂组,有统计学差异(P＜0.05),肌注组与加佐剂组间没有统计学差异(P＞0.05).结论本研究显示佐剂疫苗口服有良好的免疫原性,明胶可作为口服疫苗的候选佐剂.
