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  • 共表达中国株HIV-1 gp120与hIL-6的重组鸡痘病毒研究

    作者:江文正;金宁一;李子健;张立树;王宏;金洪涛

    目的构建共表达中国株HIV-1 gp120与人白细胞介素6(IL-6)的重组鸡痘病毒. 方法分别将HIV-1 gp120基因和hIL-6基因插入到鸡痘病毒表达载体pUTAL复合启动子ATI-P7.5和P7.5串联启动子下游,构建重组鸡痘病毒表达质粒pUTA-GP-IL6.利用脂质体法将重组质粒和鸡痘病毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞.经BUdR加压筛选3次后,重组病毒分别用PCR、间接免疫荧光试验和Western blot进行鉴定,并进行小鼠免疫研究. 结果重组病毒基因组中可扩增出1.4kb大小片段,重组病毒感染细胞表面有绿色荧光物质,表达产物的Western blot分析表明重组病毒可表达gp120和hIL-6蛋白.重组病毒可刺激小鼠产生特异性体液免疫应答. 结论成功构建了共表达中国株HIV-1 gp120与hIL-6的重组鸡痘病毒,为研制HIV-1基因工程活载体疫苗提供有益的资料.

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