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boxA及上游序列缺失突变对λ噬菌体抗转录终止功能的影响
目的研究λ噬菌体表达调控机理,阐明PL操纵子boxA及邻近序列突变对抗转录终止作用的影响. 方法利用体内同源重组技术,使大肠杆菌染色体DNA上携带了CI857,PL,nutL[boxA*(*代表不同的boxA及临近序列缺失突变)、boxB],N-lacZ,ttt,galK单拷贝基因,构建了含boxA及邻近序列突变(boxA*)的一系列新菌株,模拟了λ噬菌体感染宿主菌后的生理状态,利用抗转录终止报道基因galK分析研究了boxA及临近序列突变对PL操纵子抗转录终止作用的影响. 结果证明在缺失了boxA及部分上游序列的情况下,大肠杆菌RNA聚合酶不能通读转录终止子. 结论λ噬菌体左向操纵子具有与右向操纵子不同的转录调控现象.
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高迁移率族蛋白B1拮抗剂BoxA对癫痫大鼠的脑保护作用
目的:探讨高迁移率族蛋白B1 (high mobility group box 1,HMGB1)拮抗剂BoxA对癫痫大鼠发作与海马损伤的影响.方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组、癫痫模型(EP)组和高、中、低剂量BoxA干预组;海马微量注射海人酸制作癫痫大鼠模型,造模前侧脑室注射不同剂量BoxA对大鼠进行干预,其中假手术组海马及侧脑室分别注射等体积生理盐水.记录各组大鼠达到Ⅲ级发作的潜伏时间(seizure onset time,SOT),作为评价癫痫发作易感性指标;HE染色观察脑组织病理变化,NeuN免疫组化染色评价海马神经元丢失情况,作为评价脑组织损伤指标,磷酸化细胞核因子KB-p65(p-NFKB-p65)免疫组化染色观察其表达情况.结果:高、中、低剂量BoxA干预组大鼠SOT均显著长于EP组(P＜ 0.05);与EP组相比,BoxA干预组海马组织损伤均明显减轻,神经元丢失减少(P＜0.05);高剂量BoxA干预组较中低剂量干预组SOT延长、脑组织损伤程度减轻,但差异无统计学意义;高、中剂量BoxA干预组大鼠p-NFκB-p65表达水平较EP组明显降低(P＜0.05),而低剂量BoxA干预组与EP组间差异未显示统计学意义.结论:HMGB1拮抗剂BoxA可通过抑制NFKB活化,降低大鼠的癫痫易感性,减轻脑组织损伤,具有一定脑保护作用.
