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HPI毒力岛缺失的EAggEC17-2突变菌株的构建及其功能研究
目的构建HPI毒力岛缺失的EAggEC17-2突变株,初步研究EAggEC菌株携带的耶尔森菌HPI毒力岛合成铁载体Ybt的功能. 方法以EAggEC17-2为出发菌株,irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有氯霉素(Cm)抗性基因(cat基因)标记.通过接合转移和同源重组,构建了缺失约24 kb的HPI毒力岛功能核心区区域EAggEC17-2的全岛缺失株EA85.应用流式细胞技术(FACS)检测指示菌株WA-CS irp1::KN(pCJG3.3N)荧光强度的变化情况,对EA85缺失株和出发菌株进行了合成Ybt的功能比较研究.结果成功构建了EAggEC17-2 HPI全岛缺失株EA85.EAggEC17-2菌株具有表达Ybt的功能,而缺失株EA85丧失了合成Ybt的能力. 结论 EAggEC17-2 HPI毒力岛的缺失,使Ybt的合成彻底阻断.EAggEC 17-2具有的合成Ybt的功能是由其染色体携带的HPI毒力岛所决定的.
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EAggEC生化特征及耐药性研究
目的探讨EAggEC的生化特征及抗药性.方法从门诊腹泻标本中分离EAggEC菌株,并作DNA探针、和粘附试验、生化试验及药物敏感试验,对生化反应及药敏结果进行统计分析.结果被检菌生化特征基本相似、氧化酶阴性、触酶阳性、IMVC反应为典型的++--,但有5%(2/40)菌株不分解山犁醇.而药敏试验情况表明,对乙酰螺旋霉素、麦迪霉素、林可霉素、多粘菌素、四环素等耐药,对环丙沙星、复达新、丁胺卡那敏感,可作为当前治疗的首选药.结论本研究提示了5个监测点分离的EAggEC生化特征和耐药性基本情况.
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湖南省首次发现肠集聚性大肠杆菌
[目的]了解我省腹泻患者中是否存在EAggEC感染.[方法]采用放射性α32P标记的EAggEC核酸探针与分离菌杂交,并作HeLa细胞粘附试验.[结果]从某婴儿腹泻患者粪便分离出EAggEC,该菌培养特征及生化反应与普通大肠杆菌基本相同,IMVC++--;核酸探针及细胞粘附试验均为阳性,该菌对昆明小鼠表现较强的致病力.[结论]首次在我省分离到EAggEC.
