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ZZ结构域文献资料
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葡萄球菌蛋白A"ZZ"与EGFP的融合表达及活性测定
目的 将EGFP基因与葡萄球菌蛋白A(SPA)基因的ZZ结构域重组,尝试以融合标记的方式构建一种新型免疫亲和试剂.方法 利用基因工程技术将EGFP基因重组至pEZZ18质粒,构建原核分泌表达载体pEZZ-EGFP,通过竞争EILSA和荧光光谱测定其在大肠杆菌中表达产物ProZZ-EGFP的生物学活性.结果 pEZZ-EGFP在E.coli HB101中正确表达,所表达融合蛋白具有与哺乳动物IgG抗体结合的生物学活性和EGFP的荧光活性.结论 ProZZ-EGFP融合蛋白有ZZ结构域(SPA)和EGFP二者生物学特性,在免疫荧光测定中可作为一种通用亲和试剂.
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免疫球蛋白结合结构域的研究进展
Z结构域,又叫免疫球蛋白结合结构域,是由金黄色葡萄球菌蛋白A( Staphylococal Protein A,SPA)中B结构域改构而成.SPA是从金黄色葡萄球菌的细胞壁中发现的能与多种哺乳动物的抗体相结合的天然蛋白,组成SPA的5个结构域中,以B结构域的抗体结合力及稳定性占绝对优势.将B结构域28～29位敏感性残基Asn-Gly定向诱变成为Asn-Ala后,得到的结构域被称为Z结构域,其稳定性更高,可耐受羟铵和溴化氢的处理.首尾相连的两个Z结构域,被命名为ZZ结构域,具有与SPA相类似的抗体结合容量以及更高的稳定性,可以耐受工业纯化中苛刻的环境.ZZ结构域以其独特的反3α螺旋结构、以及特有的抗体结合能力已广泛应用于外源蛋白的可溶表达及免疫检测、抗体纯化等领域.该文将对ZZ与抗体结合的机制研究以及它在各领域的应用研究进行综述.
关键词： 免疫球蛋白结合结构域 ZZ结构域 葡萄球菌蛋白A 亲和层析
