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福赛斯拟杆菌与牙龈卟啉单胞菌表面蛋白间相互结合机制
福赛斯拟杆菌(Bacteroides forsythus, 简称B.forsythus)和牙龈卟啉单胞菌 (Porphyromonas gingivalis,简称P.gingivalis)是人类牙髓根尖周疾病以及牙周疾病的重要致病菌,在慢性根尖周炎患牙根管内定植呈正相关关系.但两菌间相互结合的蛋白分子以及结合机制目前尚未见报道.本文采用Western blot技术探讨牙龈卟啉单胞菌与福赛斯拟杆菌相互作用及其作用机制.
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慢性根尖周炎感染根管内牙龈卟啉单胞菌和福赛斯拟杆菌的定植
目的:研究慢性根尖周炎患牙感染根管内牙龈卟啉单胞菌和福赛斯拟杆菌的定植情况,探讨两者间的定植关系.方法:采集31例慢性根尖周炎患者的38颗患牙根管内标本,加热裂解法获得细菌DNA,菌种特异引物16SrDNA PCR法检测标本的牙龈卟啉单胞菌和福赛斯拟杆菌,四格表确切概率检验福赛斯拟杆菌在有、无牙龈卟啉单胞菌定植根管内的检出率,比数比(odds ratio,OR)单因素分析两者间的定植关系.结果:牙龈卟啉单胞菌和福赛斯拟杆菌的检出率分别为39.5%、26.3%,其中前者单独检出7颗患牙,后者2颗患牙,两者同时检出8颗患牙.福赛斯拟杆菌在有、无牙龈卟啉单胞菌定植根管内的检出率分别为53.33%、8.70%(P=0.0036),相关分析两菌间在慢性根尖周炎根管中的OR＞2(OR=12),呈正相关关系(P＜0.05).结论:牙龈卟啉单胞菌和福赛斯拟杆菌为慢性根尖周炎感染根管的定植菌,两者呈正相关定植.
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采用水平双相凝胶电泳法对福赛斯拟杆菌蛋白分离的初步研究
目的为分离福赛斯拟杆菌蛋白,建立一种快速、方便、高效、可靠的方法.方法福赛斯拟杆菌厌氧培养的菌细胞经超声破碎后,菌蛋白加入固相pH梯度(IPG)膨润液中或经ReadyPrep试剂处理后,在不使用加样杯、加样杯分别位于IPG的阳极端、中间、阴极端,采用pH 3～10的IPG聚丙烯酰胺凝胶条作等电聚焦电泳,梯度为8%～18%聚丙烯酰胺板状梯度凝胶进行第二相电泳,经考马斯亮兰染色或蛋白银染观察其蛋白斑点.结果①等电聚焦电泳时,未使用加样杯福赛斯拟杆菌蛋白加入膨润液中双相电泳后两种染色都未见蛋白斑点,用加样杯加入福赛斯拟杆菌蛋白经水平双相电泳后考马斯亮兰染色无斑点出现而银染出现蛋白斑点,且加样杯位于IPG中间位置时蛋白等电聚焦的效果佳.②福赛斯拟杆菌蛋白电泳图谱显示水平双相凝胶电泳能将不同蛋白分离,且绝大多数蛋白位于IPG的酸性端,即蛋白的等电点(PI)在3～7之间.结论采用水平双相凝胶电泳方法可以将福赛斯拟杆菌不同种类的蛋白分离.
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福赛斯拟杆菌在感染根管内定植及其与临床症状的关系
目的了解福赛斯拟杆菌在慢性根尖周炎患牙根管内定植情况,探讨该菌与慢性根尖周炎临床症状间的关系.方法收集38例慢性根尖周炎患牙根管标本,采用16S rDNA PCR方法检测福赛斯拟杆菌在根管内分布情况,单因素相关分析福赛斯拟杆菌在根管内定植与慢性根尖周炎疼痛、叩痛、瘘道和肿胀间关系.结果福赛斯拟杆菌在38例慢性根尖周炎根管内检出10例,检出率为26.3%,与慢性根尖周炎的急性发作临床症状疼痛、叩痛、肿胀呈正相关关系(OR分别为∞、9.0、12.0),有统计学意义(P<0.05),与瘘道不存在相关关系(OR=1.33).结论福赛斯拟杆菌能定植于根管内,是慢性根尖周炎的可疑致病菌.
