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  • 福氏2a志贺菌磷酸烯醇丙酮酸盐合成酶基因的克隆与序列分析

    作者:杨朵;金奇;杨帆;朱俊萍;黄海蓉;楚雍烈;侯云德

    目的克隆福氏2a志贺菌301株染色体编码与代谢相关的酶类基因,分析结构特点并进行同源性比较,以期部分阐明其与大肠杆菌生化特性相似的分子生物学基础. 方法鸟枪法随机克隆福氏2a志贺菌染色体DNA,经探针杂交和末端核苷酸序列测定筛选出带有磷酸烯醇丙铜酸盐合成酶(pps)完整基因的阳性克隆,利用exonuclease Ⅲ制备嵌套缺失体亚克隆,采用双脱氧链末端终止法测定核苷酸序列. 结果福氏2a志贺菌301株pps基因(全长2 474bp)与大肠杆菌pps基因核苷酸及氨基酸序列的同源性分别为98.8%和97.6%.编码区上游和下游存在较多变异.福氏2a志贺菌301株pps基因与GenBank中其它菌株pps基因的同源性均低于55%. 结论福氏2a志贺菌pps基因核苷酸序列与大肠杆菌pps基因核酸序列高度同源.

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