首页 > 文献资料
-
CTLA4-FasL双功能融合蛋白分子抑制混合淋巴细胞反应及促进淋巴细胞凋亡
目的构建人CTLA4-FasL融合蛋白真核表达载体,表达CTLA4-FasL融合蛋白,通过体外实验初步研究其生物学特性. 方法通过特异引物分别扩增出CLTA4和FasL胞外区的cDNA,将它们拼接后,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,体外表达纯化.Western blot分析CTLA4-FasL融合蛋白的抗原性.体外细胞结合试验研究其结合特异性配体作用.混合淋巴细胞反应研究其抑制免疫应答的效应. 结果测序证实所扩增的PCR产物分别是CLTA4和FasL胞外区的cDNA,其序列与文献报道相符.成功构建了pcDNA3.1-CTLA4-FasL真核表达载体.Western blot分析结果显示,表达获得的蛋白具有CTLA4和FasL的抗原性.体外细胞结合试验显示,CTLA4-FasL融合蛋白可以分别与Jurkat细胞表面的Fas受体和Raji细胞表面的B7分子结合.混合淋巴细胞反应结果显示,该融合蛋白可以有效抑制异基因淋巴细胞的刺激作用及诱导淋巴细胞凋亡,并显示了显著的协同效应. 结论成功构建了CTLA4-FasL融合蛋白真核表达载体,体外表达并纯化了CTLA4-FasL融合蛋白,体外实验证实CTLA4-FasL融合蛋白是一个可以有效抑制免疫应答的双功能分子.
关键词： 细胞毒T细胞相关抗原 Fas配体 融合蛋白 基因表达 -
CTLA-4-FasL融合分子的构建及其生物学特性的鉴定
文章通过特异的引物分别扩增出CTLA-4和FasL胞外区的cDNA,将它们拼接后,克隆人真核表达载体pcDNA3.1(+)中,进行表达、纯化,获得CTLA-4-FasL融合蛋白.Western blot分析显示了该融合蛋白具有CTLA4-胞外区和FasL胞外区的抗原性.体外试验表明,该融合蛋白可以结合Jurkat细胞表面的Fas受体和Raji细胞表面的B7分子,表明了该分子双特异性的特点.该融合蛋白能够直接诱导Jurkat细胞发生凋亡,且此凋亡效应伴随Raji细胞的参与而增强,初步证实了该分子的免疫抑制效应,从而为进一步研究该融合蛋白特性及应用奠定了基础.
关键词： 细胞毒T细胞相关抗原 Fas配体 融合蛋白 基因表达 -
CD28/CTLA4-B7协同刺激分子与角膜移植免疫
角膜移植排斥反应是移植失败的主要原因.致敏T淋巴细胞在角膜移植排斥反应中起着重要的作用,是角膜排斥过程中的主要效应细胞.而T淋巴细胞的激活需要两个信号刺激, 即除了通过APC递呈MHC处理过的抗原给抗原特异性T细胞提供第1信号外,还需协同刺激分子作为辅助信号的协同作用,才能使T细胞产生正常的免疫应答.如果缺少协同刺激分子的第2 信号,将会导致调节性T细胞的无反应性或特异性免疫耐受.
关键词： 角膜移植 协同刺激分子 B7分子 细胞毒T细胞相关抗原 -
治疗类风湿关节炎的新型生物制剂阿贝西普
1 引言类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节慢性炎症为主要表现的自身免疫性疾病,可导致关节的进行性破坏和功能丧失.目前对RA尚无根治方法,传统的改变病情抗风湿药(disease modifying antirheumatic drug,DMARD)对许多难治性RA患者无效.20世纪末以来,生物制剂如肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)拮抗药的出现为这些患者带来了福音,但仍有相当一部分患者使用TNF-α拮抗药无效、疗效欠佳或产生对该药的抗体,这些不足促使人们研究更有效、更安全的药物.
关键词： 类风湿关节炎 阿贝西普 细胞毒T细胞相关抗原 甲氨蝶呤 肿瘤坏死因子-α
