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我国Colti病毒基因分型的研究
目的对我国分离的Colti病毒进行基因分型.方法采用针对Colti 病毒B2亚组第9和12片段和B1亚组第12片段的3对引物,对我国近年来分离的Colti病毒利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行基因分型.同时对北京分离株BJ95-75和云南分离株YN-6的 PCR产物进行了克隆测序及同源性分析.结果 Colti病毒北京分离株BJ95-75、云南分离株YN-6、-67-1、-68-1、-69、-70-1、-70-2、-90、-92-2、-93病毒用B2亚组特异引物12-854-S/12-B2-R均能得到相对分子质量为850 bp的特异条带,用针对于第9片段的B2亚组引物9-JKT-S/9-JKT-R均得到了相对分子质量为492 bp的特异条带.而Colti病毒东北分离株NE97-12、NE97-31及对照病毒如环状病毒YN-99、乙脑病毒YN-151-1未能扩出特异条带.所有Colti病毒分离株及病毒对照用B1亚组特异引物12-B1-S/12-B1-R均未见特异条带.BJ95-75、YN-6这2株病毒第12片段核苷酸序列与B2亚组其他毒株间的同源性达到89.4%以上,特别是与中国早期分离株Banna病毒,其同源性达到98.9%以上;2株病毒第9片段的核苷酸序列与属于B2a型的Banna病毒的同源性可达到99.2%和96.5%,和JKT6423病毒的同源性也能达到84.0%,而与属于B2b型的JKT6969和JKT7043相应片段核苷酸序列的同源性只有53.0%左右.结论首次对我国分离的Colti病毒从分子水平上进行了研究,证实了PCR方法对Colti病毒进行基因分型的可行性,北京和云南分离株主要为B2亚组的 B2a型.吉林分离株NE97-12、NE97-31的正确分型还要依赖于将它们基因组的特定片段进行全序列分析的完成.
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云南省澜沧江下游地区虫媒病毒的调查研究
目的了解云南澜沧江下游地区自然界虫媒病毒流行情况. 方法从云南澜沧江下游地区(澜沧县和思茅市)所属乡村采集蚊虫,分类后保存于液氮.经消毒、研磨、离心等处理后接种组织培养细胞分离病毒,并进行初步鉴定. 结果从233份标本中,分离到22株致C6/36细胞病变的病毒,表现为细胞圆化、聚集、脱落.分离阳性率为9.4%(22/233).经鉴定10株对乙醚和5′-磺脱氧尿苷抵抗,为无包膜双链RNA病毒,核酸电泳为12节段RNA病毒.9株对乙醚敏感,对5′-碘脱氧尿苷抵抗,为有膜RNA病毒,核酸电泳为10条带.Colti病毒95-75单克隆抗体与新分离的12节段RNA病毒的酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验呈阳性反应,而与10节段病毒呈阴性反应.3株病毒为对乙醚敏感,其中1株被乙型脑炎病毒A2株免疫腹水中和,并与A2免疫腹水荧光试验呈阳性反应;1株(云南92-4)与布尼亚病毒组特异免疫腹水的荧光试验和ELISA试验均为强阳性,而与甲病毒组特异性免疫腹水及黄病毒组的乙型脑炎病毒免疫腹水均呈阴性反应;经负染在电镜下观察毒粒呈圆形,直径约为(87.00±0.05)nm,外层可见表面突起.结论从云南澜沧江下游地区采集的蚊标本分离到10株Colti病毒,9株环状病毒,1株为乙脑病毒,1株为布尼亚病毒,1株尚在研究中.
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东北三省10市县蚊虫调查
目的:调查东北三省10市县的蚊种组成,分离蚊媒病毒.方法:采用人帐诱法和吸蚊器吸捕法采集蚊虫.结果:在东北三省的沈阳、长春、哈尔滨等10市县采获蚊虫20901只,计5属16种.干旱草原的优势蚊种为背点伊蚊(90.5%);阔叶次生林和江岛公园的优势蚊种均为刺扰伊蚊,分别占92.9%和71.3%;芦苇塘和城市公园的优势蚊种均为凶小库蚊,分别占63.2%和71.3%;城郊住区和城市住区的优势蚊种均为淡色库蚊,分别占89.0%和和85.2%.从洮南市的背点伊蚊体内分离出Colti病毒.东北地区存在人间Colti病毒的感染发病.结论:为深入开展蚊虫的有效防制和蚊媒病毒病的研究提供了参考依据.
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云南首次分离到辛德毕斯(Sindbis)、巴泰(Batai)和Colti病毒
目的了解云南省虫媒病毒分布情况,为防治提供依据.方法在云南省思茅地区和西双版纳州采集蚊虫以及发热病人血清,液氮冻存.标本常规处理,接种C6/36细胞和乳鼠以分离病毒,并用血清学和分子生物学方法对分离到的病毒进行鉴定.同时采集发热病人和健康人血清,用ELISA和血凝抑制试验检测病毒抗体.结果从西双版纳发热病人血清中分离到1株辛德毕斯(Sindbis)病毒,从澜沧县菲律宾按蚊中分离到1株巴泰(Batai)病毒,从思茅市翠云区和澜沧县三带喙库蚊、中华按蚊、菲律宾按蚊、迷走按蚊等蚊虫中分离到10株Colti病毒.血清抗体检查,西双版纳发热病人血清中辛德毕斯病毒抗体阳性率为2.50%(3/120),巴泰病毒抗体阳性率为4.17%(5/120);思茅和西双版纳地区健康人血清中辛德毕斯病毒抗体阳性率为1.93%(11/571),其中澜沧、思茅、景洪、勐腊和勐海的阳性率依次为4.55%(6/132)、0.89%(1/112)、1.25%(2/160)、1.96%(2/102)和0.00%(0/65);西双版纳发热病人和脑炎病人血清中还检测出Colti病毒抗体.结论云南省分布有经蚊虫传播的辛德毕斯、巴泰和Colti病毒,当地人群中也存在该病毒自然感染.今后应加强这3种虫媒病毒病的调查研究和防治工作.
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Colti病毒及Colorado蜱热
Colorado蜱热（CTF）病毒属于呼肠孤病毒科Colti病毒属，是重要的虫媒病毒之一。在欧美等西方国家以蜱为虫媒，在我国和印度尼西亚Colti病毒以蚊子为媒介。本文就CTF的流行病学、临床特点、诊断技术的进展、CTF病毒的检测和部分已明确的dsRNA基因组节段的核苷酸序列作一综述。
关键词： Colorado蜱热病毒 Colti病毒 流行病学 临床 检测方法
