首页 > 文献资料
-
CTLA4Ig可诱导T淋巴细胞对氧化修饰低密度脂蛋白的免疫无反应性
目的 研究融合蛋白CTLA4Ig对氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的T淋巴细胞特异性免疫反应的作用,探索预防和延缓动脉粥样硬化发生和发展的新途径.方法 从健康成人外周血分离单核细胞,加入500IU/ml的重组人粒单细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和500 IU/ml的重组人白细胞介素4(rhIL-4),培养6 d.取1×106个细胞以流式细胞仪检测CD14的表达,其余细胞分为4组,分别加入细菌脂多糖(LPS)30 ng/ml(LPS组)、LDL10 μg/ml(LDL组)、ox-LDL 10μg/ml(ox-LDL组)和相同体积的PBS(PBS组),作用48 h,以流式细胞仪检测CD86和HLA-DR的阳性表达率和平均荧光强度(MFI).将各组DC与同种异体T淋巴细胞以1∶5和1∶10的比例混合进行同种异体混合淋巴细胞增殖反应(MLR),其中ox-LDL组在1∶5的试验中分为4个亚组,分别给予加入1.25、0.62、0.31 μg/ml的CTLA4Ig和不加CTLA4Ig的处理,各组细胞继续培养4 d,以噻唑蓝(MTT)比色法检测T淋巴细胞增殖活性,结果以刺激指数(SI)表示.结果 细胞培养6 d后CD14的阳性表达率为2.9%,证实已由单核细胞转化为DC.LPS组、ox-LDL组CD86阳性表达率(96.0%±8.8%,97.7%±11.4%)和HLA-DR阳性表达率(90.3%±8.8%,90.9%±7.0%)均明显高于LDL组(90.0%±10.2%,84.4%±9.6%)和PBS组(87.3%±8.4%,83.6%±7.0%)(均P＜0.05),ox-LDL组CD86MFI(73.4±6.6)和HLA-DR MFI(87.0±7.1)均明显高于LDL组(40.0±7.4,55.0±7.7,均P＜0.01)和PBS组(54.6±8.2,P＜0.01;70.2±6.7,P＜0.05).在MLR中,DC∶T细胞=1∶5和1∶10两种条件下,LPS组、ox-LDL组SI均明显高于LDL组和PBS组(均P＜0.05).在ox-LDL组的MLR中,以1.25、0.62、0.31和0 μg/ml的CTLA4Ig处理的各亚组SI分别为0.96±0.30,1.12±0.33,1.29±0.28和1.64±0.37,CTLA4Ig浓度为1.25μg/ml时,ox-LDL激发的同种异体MLR已被完全抑制.结论 ox-LDL可作为抗原被DC递呈,激发同种异体MLR;CTLA4 Ig能明显抑制该作用,诱导T细胞对ox-LDL的免疫无反应.这一结果为动脉粥样硬化防治的研究提示了新的思路.
