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  • 脱细胞半月板细胞外基质对半月板细胞的影响

    作者:郭维民;刘舒云;高钺;黄靖香;彭江;汪爱媛;王玉;卢世璧;郭全义

    目的探讨脱细胞半月板细胞外基质(dMECM)对传代半月板细胞增殖、细胞活性以及细胞表型的影响。
      方法用 CCK-8法检测 dMECM 对半月板细胞增殖的影响;将 P3代的内侧半月板纤维软骨细胞种植在 dMECM修饰盖玻片上,以未修饰盖玻片为对照,体外培养7、14 d后进行细胞活性检测,糖胺多糖、胶原分泌含量测定并用RT-PCR 检测半月板细胞特异性基因 mRNA 表达变化。
      结果 CCK-8结果证实,与对照组比较,生长在 dMECM修饰盖玻片上的 P3代兔半月板纤维软骨细胞具有更好的细胞增殖特性(P<0.05);细胞死/活染色结果证实 dMECM组可维持更好的细胞活性;糖胺多糖和胶原定量检测结果证实 dMECM 组在第7、14天时,比对照组分泌更多的糖胺多糖和胶原(P<0.05)。RT-PCR 的检测结果证实体外培养7、14 d 时,dMECM 组 II 型胶原 mRNA 表达显著上调(P<0.05)。
      结论 dMECM 可以很好地促进半月板纤维软骨细胞的增殖、分化以及细胞活性的维持,可能是未来半月板组织工程领域非常有前景的支架材料之一。

  • 新型脱细胞半月板细胞外基质的制备及其生物相容性的研究

    作者:郭维民;刘舒云;高钺;黄靖香;彭江;汪爱媛;王玉;卢世璧;郭全义

    目的探索新型脱细胞半月板细胞外基质(dMECM)的制备方法,并对其细胞相容性进行研究。方法无菌条件下收集新鲜的猪半月板组织,切碎,采用湿法粉碎、差速离心的方法制备 dMECM生物材料。通过天狼猩红、甲苯胺蓝染色方法分别比较天然半月板与 dMECM中胶原以及糖胺聚糖含量的区别;采用 Hoechst 33258荧光染色法观察脱细胞后 dMECM中 DNA残留情况。将 P3代的兔内侧半月板细胞种植在铺有 dMECM的盖玻片上,体外培养7 d后行扫描电镜检测其细胞相容性。结果本实验制备的 dMECM天狼猩红、甲苯胺蓝染色均呈阳性,并且与天然半月板染色类似;dMECM行 Hoechst 33258染色呈阴性;扫描电镜结果显示种植于 dMECM表面上的半月板细胞黏附紧密,可见大量细胞 ECM的分泌。结论本实验制备的 dMECM可以很好地保留天然半月板 ECM成分,有效地去除 DNA物质,并且具有良好的生物相容性,是未来半月板组织工程领域非常有前景的支架材料。

  • 脱细胞半月板细胞外基质/脱钙骨基质双相半月板支架的制备及其生物相容性的研究

    作者:苑志国;刘舒云;郝春香;黄靖香;张莉;眭翔;孟昊业;郭维民;王明杰;张雨;彭江;汪爱媛;卢世璧;郭全义

    目的:成功制备脱细胞半月板细胞外基质/脱钙骨基质双相半月板支架,并与半月板纤维软骨细胞结合研究其生物相容性。方法联合利用湿法粉碎、差速离心等物理方法和胃蛋白酶等化学方法制备脱细胞半月板细胞外基质,利用改良 Urist法制备脱钙骨基质,并利用灌注、冷冻干燥等方法分别制备脱细胞半月板细胞外基质支架、脱钙骨基质支架以及脱细胞半月板细胞外基质/脱钙骨基质双相支架等三种不同的支架,并从组织学、分子生物学、生物力学等方面研究三种支架的异同;原代培养兔半月板纤维软骨细胞,并将 P3代的纤维软骨细胞分别种植在以上三种支架上,利用扫描电镜、死/活细胞染色等观察细胞生长情况,并分别在3、7、14 d时检测纤维软骨细胞的增殖情况以及分泌胶原和糖胺多糖的含量。结果物理化学联合法脱细胞可以去除半月板中绝大部分的细胞成分,并且很好地保留正常半月板细胞外基质的胶原以及糖胺多糖成分;脱细胞半月板基质支架、脱钙骨基质支架以及脱细胞半月板细胞外基质/脱钙骨基质双相支架三种支架均具有良好的孔隙率,合适的孔径大小,扫描电镜结果显示纤维软骨细胞可以很好地在支架上生长,死/活细胞染色结果显示三种支架均可以维持良好的细胞活性,但是脱细胞半月板细胞外基质/脱钙骨基质双相支架具有更好的生物力学特性,脱细胞半月板基质支架和脱钙骨基质/脱细胞半月板基质双相支架在促进纤维软骨细胞增殖和维持细胞表型方面要比单纯脱钙骨基质支架更优。结论脱细胞半月板细胞外基质/脱钙骨基质双相支架具有较好的生物力学特性,良好的生物相容性,可以促进纤维软骨细胞增殖,同时也可以维持纤维软骨细胞的表型,是一种可以应用于组织工程半月板再生的支架。

  • 低场强磁共振诊断膝关节半月板损伤

    作者:吕文涛;王芝文;赵宝钰;李创周;朱兆兴;宋宪仁;靳仓正;段凤霞

    目的:研究低场强磁共振诊断膝关节半月板损伤的价值.材料和方法:对38例临床可疑半月板损伤的患者进行MR扫描,其结果和关节镜检查进行对照研究.根据半月板MR信号特征将半月板损伤分为0-Ⅲ度.结果:在38例76个半月板中,61个(80.3%)半月板呈0-Ⅲ度表现,15个(19.7%)损伤的半月板不能进行0-Ⅲ度分型.结论:如能认真准备,优化MR成像参数及对图像进行后处理,低磁场MRI同样能准确地诊断半月板损伤.

  • 膝关节镜下半月板切除72例临床分析

    作者:王英振;陈晓亮;王湘达;郑洪军

    1991年7月~1997年7月,我院行膝关节镜下半月板切除术72例,取得良好效果.现将结果报告如下.1 临床资料1.1 一般资料本组72例,男42例,女30例;年龄23~55岁,平均35岁.其中右膝关节42例,左膝30例;外侧半月板破裂45例,内侧破裂27例;半月板后角损伤25例,体部损伤38例,前角损伤9例;纵裂22例,边缘破裂4例,桶柄样裂10例,不规则破裂25例,磨损退化11例;外侧盘状半月板10例.

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