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维生素K2对骨髓增生异常综合征细胞株MDS-JSN04生长抑制作用及其机理研究
为了探讨维生素K2(VK2)对骨髓增生异常综合征细胞株MDS-JSN04生长的抑制作用及其作用机制,采用细胞形态学方法观察VK2处理后细胞形态的改变;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测VK2对细胞生长的抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡、细胞周期变化和髓系分化抗原CD11b、CD13的表达情况;RT-PCR技术检测抗凋亡基因bcl-2、survivin和促凋亡基因bax的表达;用发光比色法检测caspase-3活性.结果表明:VK2作用细胞株72小时后,细胞呈现典型的凋亡细胞的形态特征;细胞的凋亡率随着VK2浓度的增加和作用时间的延长而逐渐增高,经统计学处理与对照组比较有显著性差异(P＜0.01);S期和G2期细胞随着药物浓度的增加而逐渐减少,G0/G1期细胞逐渐增多,与对照组比较有显著性差异(P＜0.01),细胞被阻滞在G0/G1期,而且在G0/G1期前出现明显的亚G1期细胞即凋亡峰;抗凋亡基因bcl-2、survivin表达随着VK2浓度的增高而明显下调((P＜0.05),而促凋亡基因bax表达无明显变化((P＞0.05),caspase-3的活性随着VK2浓度的增加和作用时间的延长而逐渐增强.结论:VK2主要是通过激活caspase-3途径诱导MDS-JSN04细胞发生凋亡,同时抗凋亡基因bcl-2和survivin也参与了凋亡调控过程.
关键词： 维生素K2 骨髓增生异常综合征 MDS-JSN04细胞株 细胞凋亡 细胞周期 -
非生长因子依赖的MDS细胞系的建立及其生物学特性研究
本研究的目的是从骨髓增生异常综合征-慢性粒-单核细胞白血病(MDS-CMML)病人获取骨髓细胞,建立非生长因子依赖的细胞株.该细胞株在不添加任何生长因子的含15%胎牛血清的RPMI 1640和DMEM混合培养液中进行了培养,并分别从细胞株的形态、细胞表面抗原分子、细胞增殖、分化、凋亡等方面检测其生物学特性.结果表明:在不添加任何生长因子的培养条件下该细胞株可以长期存活和生长,并能向单核及巨核细胞分化.结论:成功建立了一株非生长因子依赖的MDS-JSN04(MDS-江苏南京04)细胞株,并阐明了其部分生物学特性.
