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抗CD47单克隆抗体(B6H12)对人树突状细胞成熟及其功能的影响
为阐明可溶性的抗CD47单克隆抗体(B6H12)对树突状细胞(DC)的免疫调控作用及分子机理,联合应用rhGM-CSF、IL-4、细菌脂多糖(LPS)在体外诱导扩增人外周血单核细胞来源的DC,并在培养体系中添加抗CD47单克隆抗体(B6H12);采用透射电镜观察DC形态,流式细胞术检测DC膜表面分子的表达;ELISA法检测DC释放的IL-12P70水平;BrdU-ELISA法检测DC刺激同种异型淋巴细胞增殖,凝胶电泳迁移率改变实验(EMSA)检测NF-κB结合活性变化.结果发现:①经抗CD47单克隆抗体(B6H2)处理的DC,膜表面标记(CD80、CD86、CD1a、CD83、DR)的表达显著地低于未加B6H12单克隆抗体DC组(P<0.05);其释放IL-12P70蛋白质的能力及刺激同种异型淋巴细胞增殖的能力也显著低于对照组(P<0.01).②与未加B6H12单克隆抗体DC组相比,B6H12单克隆抗体处理DC组的NF-κB活性显著降低(P<0.05),并且这种抑制作用随单克隆抗体浓度增大而增强.结论:可溶性的抗CD47单克隆抗体通过抑制NF-κB的结合活性,影响着DC向成熟发育及功能.
关键词: 树突状细胞 B6H12 CD47分子 免疫耐受 核转录因子kappa B