首页 > 文献资料
-
ICOS-Ig融合蛋白阻断ICOS信号通路可抑制异基因反应性T淋巴细胞的功能
本研究探讨ICOS-Ig融合蛋白阻断ICOS-B7h信号通路对异基因反应性T淋巴细胞的作用和机制.建立稳定高表达ICOS-Ig的CHO细胞株,培养制备纯化的ICOS-Ig融合蛋白;以C57BL/6小鼠脾脏来源的CIM+淋巴细胞为反应细胞,BABL/C骨髓源成熟树突状细胞为刺激细胞,应用不同浓度梯度的ICOS-Ig干预,以相同浓度的人Ig作为对照.结果显示:获得的目标蛋白的分子量为54 kD,内毒素含量<10 Eu/ml.ICOS-Ig在≥10 μg/ml时可显著减少DC刺激引起的异基因反应性T淋巴细胞的增殖效应(P<0.01).ICOS-Ig不影响T淋巴细胞的活化,ICOS-Ig浓度与CD4+T淋巴细胞的凋亡成正相关.单纯刺激组、ICOS-Ig 10 μg/ml和20μg/ml干预组的CIM+An-nexin V+PI-细胞群的频率分别为15.1%、26.4%和33.6%.ICOS-Ig作用后,Th1细胞因子TNFα分泌降低,Th2细胞因子IL-4分泌增加.结论:ICOS-Ig融合蛋白阻断ICOS通路可明显减弱异基因反应性T淋巴细胞的增殖反应,并改变Th细胞的极化,对CD4+T淋巴细胞的活化无影响,但可促进活化的T淋巴细胞凋亡.
-
供体NK细胞对非清髓异基因造血干细胞移植受体异基因反应的抑制作用
异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT)可以彻底治愈恶性血液病,且复发危险小.但allo-HSCT存在发生移植物抗宿主病及移植排斥反应的风险,临床上主要采用清髓照射及非特异性免疫抑制剂来应对,但部分患者难以承受高强度的移植前预处理,因此有效的非清髓allo-HSCT就显得尤为重要.供体NK细胞可以特异性地抑制或清除受者的反应细胞,从而促进造血干细胞的植入.本研究旨在探寻供体NK细胞在allo-HSCT中所发挥的作用.
-
粒细胞集落刺激因子联用激素和(或)免疫抑制剂动员供体小鼠外周血造血干细胞对其免疫系统的影响
目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)联用激素和(或)免疫抑制剂动员供体小鼠外周血造血干细胞对其免疫系统的影响.方法:根据对供体C57BL/6小鼠动员方案不同分为4组,G-CSF组(250 μg/kg,连用4 d),G-CSF(250 μg/kg,共4 d)+甲泼尼龙组(100 mg/kg,第3天),G-CSF(250 μg/kg,共4 d)+甲泼尼龙(100 mg/kg,第3天)+环孢素A组(100 mg/kg,第3天)和PBS对照组.观测动员后供体小鼠T淋巴细胞对BALB/c小鼠脾细胞的单向混合淋巴细胞反应(MLR),ELISA法测定供体鼠脾细胞培养上清中细胞因子IFN-γ、IL-4、TGF-β1的水平,RT-PCR半定量测定IFN-γ、IL-4的mRNA水平.结果:3个实验组MLR刺激效率分别为42%、21%和39%,与PBS对照组的68%相比有显著性差异(P＜0.01);各实验组与PBS对照组相比,培养上清中IFN-γ表达明显减低,IL-4、TGF-β1明显增高(P＜0.01),而各实验组之间无显著差异;RT-PCR半定量测定发现IFN-γ mRNA表达明显减低,IL-4明显增高(P＜0.01).结论:G-CSF联用激素和(或)免疫抑制剂动员供体小鼠外周血造血干细胞可降低其T淋巴细胞异基因反应性,改变其细胞因子分泌类型,可能易于诱导受体免疫耐受.
