首页 > 文献资料
-
急性单核细胞白血病新抗原MLAA-22的生物信息学分析及相关鉴定
本研究采用生物信息学方法对SEREX法筛库获得的急性单核细胞白血病抗原新基因MLAA-22进行分析,并进一步做基因表达鉴定.通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库检索MLAA-22基因的相关信息,分析MLAA-22抗原CTL表位,制备其多克隆抗体;利用荧光定量PcR及免疫印迹鉴定的方法,在转录翻译水平检测该基因的表达.结果表明:肿瘤抗原新基因MLAA-22 cDNA全长为2.0 kbb,定位于染色体17q11.2,编码631个氨基酸,蛋白分子量约72.4 kD,非分泌型,亚细胞定位在胞浆,属于不稳定蛋白,但具有一定的亲水和热稳定性,无信号肽.MLAA-22有多个基序(motif),可能在细胞的生长、增殖、分化和凋亡中具有重要作用.应用Protean等软件分析选取了序列543-556位作为MLAA-22的抗原表位,采用多通道同步固相全自动合成系统合成15肽,将纯化后的MLAA-22预测抗原多肽通过C末端Cys的-SH与KLH偶联,免疫兔子,制备相应的多抗,ELISA法检测抗体效价1:8000.Real-time PCR和Western blot检测结果显示MLAA-22在M,患者中有不同程度的表达,且表达量高于正常人,在其他血液肿瘤细胞中低表达,但在胃、肾和前列腺癌等组织中不表达.结论:mlaa-22是一个新的急性单核细胞白血病相关抗原新基因,有进一步研究的价值.
-
白血病相关抗原基因 MLAA-22在不同白血病细胞系中的表达
目的：：探讨白血病相关抗原基因 MLAA-22在不同白血病细胞系中的表达。方法：采用实时荧光定量 PCR 方法检测 MLAA-22基因在不同白血病中的表达水平。结果：MLAA-22基因在各白血病细胞系均有表达。结论：MLAA-22基因表达升高可能与急性单核细胞白血病、急性粒细胞白血病部分分化型、急性早幼粒细胞白血病、急性 T 淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病的发生均有关。
关键词： MLAA-22 急性单核细胞白血病 实时荧光定量 PCR -
急性单核细胞白血病相关抗原基因MLAA-22全长的克隆及生物信息学分析
目的 获得急性单核细胞白血病相关抗原基因MLAA-22cDNA全长序列,以便进行新基因的生物学功能研究.方法 本研究采用cDNA末端快速扩增法(rapid-amplification of cDNA ends,RACE),从人急性单核细胞白血病细胞株U937中克隆获得了的cDNA全长,并对MLAA-22进行了生物信息学分析及预测.结果 MLAA-22 cDNA全长3067bp,染色体定位于17q11.2,基因包含12个外显子和11个内含子.生物信息学预测其有完整的ORF框,编码1个含有701个氨基酸残基的蛋白质,蛋白分子量约80.5 kD,非分泌型,亚细胞定位为胞质蛋白.大多数capase酶均对MLAA-22无剪切作用.新的MLAA-22序列的5'端序列1-349 bp与KIAA0100 mRNA无同源性,但这一段序列与人类基因组序列完全匹配,属于MLAA-22的5'UTR(untranslated regions,UTR).结论 MLAA-22基因cDNA全长3067 bp,5 'UTR可能发生了选择性剪接,推测MLAA-22可能是一个和急性单核细胞白血病相关的新的选择性剪接变体,它参与了急性单核细胞白血病的发生,值得进一步深入研究.
-
MLAA-22在急性单核细胞白血病中的表达及临床意义
目的:检测MLAA-22基因及其编码蛋白在不同状态急性单核细胞白血病(M5)中的表达,探讨MLAA-22是否可作为M5特异性标记应用于临床.方法:收集临床初诊、完全缓解及复发的M5患者骨髓血,应用荧光实时定量PCR(QRT-PCR)及Western blot检测各组MLAA-22 mRNA及蛋白质的表达,比较、分析基因及蛋白在各组中的表达变化,分析MLAA-22与M5疗效及转归的关系.结果:MLAA-22 mRNA在初诊的M5中特异性高表达,与完全缓解组表达差异具有统计学意义(P＜0.01),与复发组差异无统计学意义(P＞0.05).MLAA-22蛋白在初诊的M5中显著高表达,完全缓解组MLAA-22蛋白表达较初诊患者明显下降.结论:MLAA-22 mRNA及蛋白在急性单核细胞白血病中特异性高表达,有望成为急性单核细胞白血病诊断、临床疗效评估、预后判断及微小残留病监测的特异性指标,值得深入研究.
