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动员外周血造血干细胞移植物中同时高效去除T/B细胞的体外研究
单倍体相合造血干细胞移植时,去除移植物中的T细胞和B细胞可减少移植物抗宿主病和EBV相关的淋巴细胞增殖性疾病的发生.本研究在国内首次应用CliniMACS系统,通过CD3/CD19磁珠抗体同时有效地去除动员外周血造血干细胞中的T细胞和B细胞.用流式细胞术检测移植物中T细胞和B细胞的去除效率,以集落形成实验评价去除后的干细胞功能.结果表明:T细胞和B细胞去除之前单个核细胞总数为4.88×1010,去除之后移植物中T细胞比例为0.02%,去除4.4 Log;B细胞比例不到0.01%,至少去除3.3 Log.移植物中除CD34+细胞外,还包括NK细胞,单核细胞和粒细胞.CD34+细胞纯度为0.98%,计数1.84×108,回收率为69.7%;NK细胞计数2.54×109,回收率为71.7%.集落形成实验显示CD3/CD19去除对造血干细胞功能无影响.结论:应用CliniMACS系统可有效地同时去除动员外周血干细胞中的T细胞和B细胞,且不影响造血干细胞的生物学功能,此项研究为去除T/B细胞的单倍体相合造血干细胞移植提供了技术平台.
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选择性去除表达CD25+、CD69+的同种异体反应T细胞的实验研究
目的 探讨体外选择性去除表达CD25+、CD69+的同种异体反应T细胞协调移植物抗宿主病和移植物抗肿瘤的可能性.方法 流式细胞仪检测初次单向混合淋巴细胞反应CD25+、CD69+表达情况,磁性细胞分离系统在细胞表达高峰去除CD25+、CD69+同种异体反应T细胞.MTT法在各时间点检测不同抗原组再次混合淋巴细胞反应的细胞增殖情况.结果 再次单向混合淋巴细胞反应显示明显降低了对相同刺激原的反应性(48.82±13.71)%,保留大部分对无关刺激原的反应性(65.47±9.84)%和肿瘤刺激原的反应性(64.83±3.65)%.结论 体外选择性去除表达CD25+、CD69+的同种异体反应T细胞可以协调移植物抗宿主病和移植物抗肿瘤.
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T细胞去除在异基因造血干细胞移植中的应用
T细胞去除(TCD)对allo-HSCT的疗效具有双重性,既能预防GVHD,又会导致移植排斥、白血病复发率的升高及免疫重建延迟和EB病毒相关的淋巴增殖性疾病增加,因此限制了它的临床应用.通过改进TCD技术有望达到既预防GVHD又不影响植入、抗白血病活性及免疫重建的目的.
关键词： T细胞去除 异基因造血干细胞移植 移植物抗宿主病
