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mPEG修饰红细胞的动物实验
本研究采用异硫氰酸荧光素标记鼠、猕猴、猪和人的修饰与未修饰自体和异体红细胞(RBC)并给小鼠和猕猴实施输注,观察回输体内RBC 24小时存活率的变化和差异.结果发现:未修饰小鼠RBC在小鼠体内24小时存活率为74%,2.0 mmol/L mPEG-SPA修饰的小鼠RBC在小鼠体内24小时存活率为45%,两者间有显著差异;未修饰人RBC在小鼠体内24小时存活率为8%,2.0 mmol/L mPEG-SPA修饰人RBC在小鼠体内24小时存活率为5%,两者间无显著差异.修饰的猕猴RBC自体回输后24小时的存活率大于90%,而修饰的人RBC和猪RBC在给猕猴回输后2小时其存活率已降至零.结论:RBC标记方法及不同种实验小鼠的选择对小鼠实验结果影响不大,但mPEG种类和浓度对鼠RBC寿命的有一定程度影响.用鼠RBC做自体回输来评价mPEG修饰人RBC的中mPEG是否影响人红细胞的寿命是不可靠的,修饰人RBC回输给小鼠可以作为评价修饰人RBC寿命和安全性的动物模型.大哺乳动物异种RBC输注很难观察到修饰RBC的存活率和寿命长短.适合评价修饰人RBC寿命和安全性的大动物模型有待于进一步探索.
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不同相对分子质量mPEG-SPA修饰血小板CD42a效果差异分析
目的 观察mPEG-SPA对血小板抗原的修饰效果,并比较不同相对分子质量的mPEG-SPA修饰效果有无差别.方法 分别用相对分子质量为5000、20 000的mPEG-SPA对血小板CD42a进行化学修饰;流式法检测修饰前后CD42a荧光强度变化;模拟CD42a三维空间结构,分析赖氨酸区域在CD42a的分布情况.结果 经5000和20 000的mPEG-SPA修饰后,CD42a荧光强度与对照组相比明显降低,降低比例分别为85.54%和88.65%.CD42a分子表面表达多个赖氨酸区域.结论 5000和20 000的mPEG-SPA对血小板CD42a均具有良好的化学修饰作用,20 000的mPEG-SPA修饰效果优于5000 mPEG-SPA的修饰效果.
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mPEG-SPA修饰人红细胞RhD血型抗原的研究
目的 观察mPEG-SPA(甲氧基聚乙二醇-琥珀酸亚胺丙酸酸酯)对人红细胞RhD血型抗原修饰的效果,并探讨mPEG-SPA修饰的可行性.方法采,用mPEG-SPA修饰人红细胞血型RhD抗原,并观察其对红细胞形态、结构和功能的影响.结果 2.0mmol/L的mPEG-SPA在pH8.0室温条件下可有效遮蔽红细胞表面RhD抗原,且与红细胞结合牢固,对红细胞的形态、渗透脆性、自身溶血率、红细胞膜胆固醇含量、乙酞胆碱酯酶活性、Na+K+ATP酶活性、2,3-DPG含量、血沉值、变形指数和常规指标均无明显影响.结论 采用2.0 mmol/L mPEG-SPA遮蔽人红细胞RhD抗原获得了初步成功.
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mPEG修饰红细胞解决AIHA患者配血困难的体外研究
目的探讨mPEG-SPA修饰对红细胞结构功能的影响,以及修饰O型红细胞解决AIHA患者疑难配血的可能性.方法对比2.0mmol/L mPEG-SPA修饰前后RBC保存期内的结构和功能指标,采用抗球蛋白法对比修饰前后的配血结果,采用流式细胞术观察mPEG-SPA修饰对自身抗体的遮蔽效果.结果保存期内2.0mmol/L mPEG-SPA修饰RBC对其结构功能无影响,配血结果表明2.0mmol/L mPEG-SPA修饰的RBC符合临床用血要求,流式检测结果显示mPEG-SPA修饰对自身抗体有很好的遮蔽效果.结论 mPEG修饰RBC有可能为解决AIHA患者配血困难开辟一条实用有效途径.
