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酶免疫染色技术快速检测鼠疫F1抗原的应用效果评价
目的 评价酶免疫染色法检测鼠疫F1抗原效果.方法 通过辣根过氧化酶标记鼠疫F1单克隆抗体(HRP-F1McAb)免疫染色法,检测266只强毒鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)感染鼠脏器标本和207只对照啮齿动物标本,同时用反向间接血凝试验(RIHA)微量法和胶体金纸上色谱法(RGICA)进行对比.结果 HRP-F1McAb免疫染色法和RIHA检测一致率为98.52％,Kappa值为0.970,阳性检出率差异有统计学意义(x2=5.140,P=0.016);HRP-F1McAb免疫染色和RGICA检测一致率为98.50％,Kappa值为0.901,阳性检出率差异无统计学意义(x2=0.250,P=0.625).HRP-F1McAb免疫染色法灵敏度为100％,特异度为97.02％,阳性预测值为97.14％,阴性预测值为100％,约登指数为0.970.结论 鼠疫F1抗原免疫染色法敏感特异、快速简单,在鼠疫早期快速诊断中有应用价值.
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酶免疫染色法检测抗中性粒细胞胞浆抗体及其应用
抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplasm antibody,ANCA)是近十多年来才逐渐认识的一种自身抗体,1982年由Davies首先报道.是一种针对中性粒细胞和单核细胞胞浆抗原成分的自身抗体.有关ANCA在韦格纳肉芽肿(WG)、多发性微动脉炎(MPA)方面的诊断、治疗中的研究已较多[1,2],而ANCA在其它疾病诊治方面的应用虽有报道但较少[3～5],笔者用酶免疫染色法检测了173例数种疾病的患者的血清及30例对照者血清,证实ANCA在MCTD、RPGN、IgAN等疾病的诊治中也有一定的价值.同时对ANCA阳性组、ANCA阴性组间的IgG、IgA、IgM、C3、C4的结果进行比较,认为两组之间无显著性差异.
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酶标鼠疫F1McAb在酶免疫染色法快速鉴定鼠疫菌中的应用
目的观察酶标鼠疫F1McAb在酶免疫染色法快速鉴定鼠疫菌中的应用效果.方法实验感染鼠疫强毒菌的病死小鼠和处死健康小鼠尸体,20℃以上室温放置,用鼠疫F1McAb酶免疫染色法检测,同时用细菌学检验方法分离鼠疫菌和反向血凝试验(RIHA)检测鼠疫F1抗原.结果直接培养仅从5d内的鼠尸分离检出鼠疫菌,阳性率为53.3%;动物实验检出鼠疫菌的长时间为8d,阳性率为71.6%.存放13d内,酶免疫染色阳性率为99.1%,RIHA阳性率98.2%,用酶免疫染色法和RIHA检测健康动物腐败脏器全部阴性.以上方法检查鼠疫疫区自毙动物标本12份,酶免疫染色法阳性7份,RIHA阳性6份,动物实验阳性5份,直接培养未获得阳性结果.结论酶免疫染色法检查动物腐败脏器中的鼠疫菌具有较高的敏感性和特异性.
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鼠疫F1McAb酶免疫染色法快速检验鼠疫菌
为缩短检验鼠疫菌的时间,建立了酶免疫染色法检验鼠疫茵的方法,被检涂片标本用含过氧化物酶底物的固定液,固定标本同时,内源性过氧化物酶被消耗,辣根过氧化物酶标记鼠疫F1单克隆抗体和鼠疫菌菌体表面的特异性F1抗原结合,底物被酶催化生成有色沉淀物使鼠疫茵着色,用普通光学显微镜观察结果,常温1h出结果,Kaplow法鼠疫菌被蓝色晶体覆盖,DAB法鼠疫菌呈棕黄色,不含F1抗原的8株细菌均为阴性,酶免疫染色法具有特异、快速、简便的特点,可用于鼠疫茵的快速检验.
