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酶免疫染色技术快速检测鼠疫F1抗原的应用效果评价
目的 评价酶免疫染色法检测鼠疫F1抗原效果.方法 通过辣根过氧化酶标记鼠疫F1单克隆抗体(HRP-F1McAb)免疫染色法,检测266只强毒鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)感染鼠脏器标本和207只对照啮齿动物标本,同时用反向间接血凝试验(RIHA)微量法和胶体金纸上色谱法(RGICA)进行对比.结果 HRP-F1McAb免疫染色法和RIHA检测一致率为98.52％,Kappa值为0.970,阳性检出率差异有统计学意义(x2=5.140,P=0.016);HRP-F1McAb免疫染色和RGICA检测一致率为98.50％,Kappa值为0.901,阳性检出率差异无统计学意义(x2=0.250,P=0.625).HRP-F1McAb免疫染色法灵敏度为100％,特异度为97.02％,阳性预测值为97.14％,阴性预测值为100％,约登指数为0.970.结论 鼠疫F1抗原免疫染色法敏感特异、快速简单,在鼠疫早期快速诊断中有应用价值.
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自喜玛拉雅旱獭牙髓检出鼠疫F1抗原
2000年7月,在青海省乌兰县赛什克乡南柯柯村的鼠疫监测中,收集到干枯的喜玛拉雅旱獭头骨2份.经实验室剖检,发现门齿牙髓部分较为湿润,遂进行鼠疫细菌学和反相血凝(RPHA)检查,结果报告如下.
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鼠疫F1单克隆抗体建株过程中的动物免疫
目的探讨在建立抗鼠疫F1抗原的单克隆抗体杂交瘤株的过程中抗原免疫的剂量及免疫方法.方法采用F1抗原常规免疫、改良的F1抗原脾内注射免疫以及EV菌免疫3种方法免疫6～8周龄,体重为10～20g,健康的雌性BALB/c小鼠,并用间接ELISA法检测尾血中的抗体. 结果在常规免疫中,200μg 组和100μg组免疫效果优于50μg组,而200μg组和100μg组免疫效果基本一致;改良的F1抗原脾内注射免疫,血中抗体效价较高;EV菌免疫的效果不理想. 结论用F1抗原常规免疫小鼠,免疫剂量用100μg/只较为合适;若要缩短免疫时间,采用改良的脾内注射免疫法是理想的选择.
