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细粒棘球蚴原头节18 kU纯化抗原ELISA的建立及其对两型包虫病鉴别诊断的意义
目的用细粒棘球蚴原头节18 ku纯化抗原建立ELISA诊断方法,用于两型包虫病的鉴别诊断.方法用18 ku纯化抗原ELISA方法对44例泡型包虫病(AE)、70例囊型包虫病(CE)、29例囊虫病和30例健康人血清中特异性抗体进行检测,同时用羊包囊液抗原(Bu)常规ELISA法检测上述血清做比较.结果 18 ku纯化抗原检测不同血清的阳性率为:AE 90.91%、CE 11.43%、囊虫病和健康人血清均为阴性;Bu抗原分别为:AE 97.73%、CE 88.57%、囊虫病51.72%和健康人10.0%.18 ku-ELISA对AE血清诊断敏感性为90.91%、特异性93.80%、阳性预示值为83.33%、阴性预示值96.80%.结论两型包虫病患者体内18 ku抗体水平存在明显差异,纯化抗原18 ku-ELISA可用于两型包虫病的鉴别诊断,较免疫印渍法简便快速.
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丙型肝炎病毒不同编码区His融合抗原的表达与纯化
目的:表达和纯化丙型肝炎病毒(HCV)-Core、NS3和NS4的His融合抗原H-C、H-NS3和H-NS4,并初步探讨其在抗体检测中的应用.方法:用重组基因工程技术,构建3种重组质粒C-pET-28a-c(+)、NS3-pET-28a-c(+)和NS4-pET-28a-c(+)以及相应的工程菌;质粒经双酶切、PCR和测序鉴定正确后,IPTG诱导抗原表达,从IPTG使用浓度、诱导温度与时间3个方面优化抗原表达条件;用NTA柱纯化抗原后,分别用单片段重组抗原和混合抗原以酶联免疫吸附试验(EUSA)检测100份HCV抗体阳性血清和40份健康人血清.结果:用单片段重组抗原和混合抗原检测的100份HCV抗体阳性血清中,H-C、H-NS3和H-NS4的抗体阳性率分别为91%、75%和52%,而H-C、H-NS3和H-NS4混合抗原的抗体检出率为100%;检测40份健康人血清,结果全部为阴性.结论:HCV不同编码区单片段His融合抗原具有不同的抗体检出率,但均低于混合抗原的阳性率:在开发
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梅毒螺旋体Nichols株的液氮冷冻保存及不同传代周期的结果观察
1948年Nelson等[1]首先建立了梅毒螺旋体制动试验(TPI),到70年代至今已被更为敏感、特异性良好、既经济又简便的荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)所代替.这类特异性试验试剂盒的研制都是以梅毒螺旋体Nichols株作为特异性抗原的,因此,Nichols株的保存、传代、抗原纯化是特异性试验试剂盒研制的关键.我们性病中心的梅毒螺旋体Nichols株是1978年自WHO引进,采用家兔睾丸传代和液氮内保存至今,按常规我们每隔3～4个月复苏菌株接种家兔1次,为了解延长传代间隔期、菌株活性及发病情况有无变化,我们做了3种不同传代周期的观察研究,现报告如下.
