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旋毛虫幼虫侵入小鼠肠上皮细胞后细胞蛋白变化的研究
目的 观察旋毛虫幼虫侵入前后小鼠肠上皮细胞蛋白的变化,筛选幼虫侵入相关蛋白.方法 将旋毛虫感染性幼虫接种至小鼠小肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IECs)单层,于37℃5％ CO2条件下培养2h,提取细胞蛋白,进行SDS-PAGE与Western blot分析,并与正常IECs细胞蛋白比较.结果 SDS-PAGE分析表明,IECs与感染性幼虫共孵育后的IECs蛋白带数为44条,与正常IECs对照组的相同;Western blot显示,正常IECs蛋白不能被旋毛虫感染鼠血清识别,与幼虫共孵育后的IECs蛋白有16个组分带能被旋毛虫感染鼠血清识别,分子质量单位分别为125、118、106、98、70、64、50、47、46、40、34、33、31、29、27、26 ku.结论 小鼠IECs与旋毛虫幼虫共培养可产生能被旋毛虫感染鼠血清识别的细胞蛋白,该组蛋白可能是旋毛虫侵入相关蛋白.
关键词： 旋毛虫 侵入相关蛋白 肠上皮细胞 Western blot -
旋毛虫幼虫侵入胃上皮细胞后虫体与细胞蛋白变化的研究
目的 观察旋毛虫幼虫对胃上皮细胞的侵入及侵入前后虫体与细胞蛋白的变化,筛选幼虫侵入相关蛋白.方法 将旋毛虫感染性幼虫接种至胃上皮细胞(SGC-7901)单层,37℃5％CO2条件下培养不同时间后在倒置显微镜下观察幼虫侵入情况；培养18 h后分别提取虫体与细胞蛋白,进行SDS-PAGE与Western blot分析. 结果 旋毛虫幼虫培养6 h时已侵入细胞单层,18 h在幼虫头端与尾端可见鞘的形成.SDS-PAGE结果表明,幼虫与细胞共培养后比仅在培养基中培养的幼虫增加了3条蛋白带,减少了4条蛋白带；细胞与幼虫共培养后细胞蛋白增加了3条蛋白带,减少了2条蛋白带.Western blot分析显示,幼虫与细胞共培养后虫体蛋白多了3条被旋毛虫感染鼠血清识别的反应带(58、21、18 ku),少了3条反应带(98、86、31 ku)；细胞与幼虫共培养后细胞蛋白多了6条被旋毛虫感染鼠血清识别的反应带(96、62、40、34、29、22 ku),少了2条反应带(98、15 ku). 结论 旋毛虫幼虫可侵入体外培养的胃上皮细胞单层；幼虫与细胞共培养后增加的被感染鼠血清识别的虫体与细胞蛋白可能是幼虫分泌的侵入相关蛋白.
关键词： 旋毛虫 侵入相关蛋白 胃上皮细胞 SDS-PAGE Western blot
