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原生动物阴道毛滴虫的酵酶长寿保障基因LAG1同源基因克隆和序列分析
为了探讨寄生性原虫阴道毛滴虫细胞生长和衰老相关基因,作者从阴道毛滴虫的cDNA表达文库中分离出一具910碱基对的cDNA克隆,其编码框长834 bp,推测蛋白质序列有277个氨基酸.序列分析显示该克隆与酵酶长寿保障基因LAG1同源性高,其氨基酸序列中含有LAG1及其同源基因保守的Lag1结构域和TLC结构域以及6个跨膜螺旋区和一个C-未端的内质网保留信号域.因此推测该克隆系酵酶LAG1的同源基因,该基因可能参与阴道毛滴虫的神经酰胺生物合成以及调解细胞的生命期或细胞衰老.该基因的基因组DNA与其cDNA序列一致,提示该基因序列中可能无内含子.
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基于ITS2序列的杜仲及其主要混伪品的鉴定
目的 分析杜仲及其混伪品的ITS2条形码序列,探讨杜仲及其混伪品鉴定的新方法,为杜绝市售商品药材混乱现象提供技术支撑.方法 提取样品DNA,利用PCR方法对样品进行核基因ITS2片段扩增,采用DNA克隆测序技术对ITS2基因进行双向测序,所得序列经Seqman程序拼接后,用软件MEGA 4.1进行相关数据分析,并构建邻接(Nighbor-joining,NJ)树.利用网站已建立的ITS2数据库预测ITS2二级结构.结果 杜仲种内大K2P遗传距离远远小于其与混伪品的种间小K2P遗传距离；由构建的系统聚类树图可以看出,不同来源的杜仲样品聚成一支,表现为单性系,并与其他混伪品明显分开；比较ITS2二级结构发现,杜仲与其混伪品在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异.结论 ITS2序列作为DNA条形码可以有效地鉴别杜仲及其混伪品,为其种质资源鉴定及临床安全用药提供了重要分子依据.
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野山参与移山参、栽培参的鉴定技术研究
[目的]建立鉴别野山参、移山参、栽培参的科学方法.[方法]采用随机扩增多态DNA(RAPD)新方法对野山参与栽培参进行鉴定.[结果]野山参和栽培参DNA用经过筛选的引物扩增结果显示两者有一定差异,虽然很小,但通过RAPD筛选引物,能找到合适的引物加以检测.[结论]应用RAPD方法作为人参(药材)的鉴定是灵敏的,而且稳定、实用,为高科技手段渗透到传统中药材开发、营销等方面起到不可估量的作用.
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1个新的Bm等位基因鉴定附文献复习
目的 鉴定1例Bm新等位基因.方法 ABO血清学定型使用标准血清学实验方法,对ABO基因7个外显子及其侧翼序列作PCR扩增、基因克隆和测序分析.结果 血清学检测1例Bm表型;DNA克隆和测序分析显示,此献血者的ABO基因为B/O02基因型,在B等位基因第7外显子存在503G＞T错义突变,导致α1,3-D-半乳糖转移酶的氨基酸发生R168L置换,表现为Bm亚型.在120个随机正常人标本中未检出此突变.结论 鉴定证实发现1个新的Bm等位基因,其R168L氨基酸置换改变了酶的保守区域,可能由此导致了B酶活性下降,出现Bm亚型.
