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活性氧清除剂 NAC 抑制阴道毛滴虫排泄分泌物诱导的 SiHa 细胞凋亡
本研究旨在探讨活性氧（ ROS）清除剂N－乙酰－L－半胱氨酸（ NAC）能否抑制滴虫排泄分泌物（ Tv ESP）诱导的人子宫颈癌SiHa细胞凋亡。体外培养阴道毛滴虫并制备Tv ESP，分别用100μg／mL Tv ESP和PBS处理SiHa细胞， Tv ESP处理SiHa细胞30 min前加入NAC，进行预处理。使用CellTiter 96 AQueous单溶液细胞增殖检测试剂盒检测细胞存活率；利用2′，7′－二氯荧光黄双乙酸盐（ DCFH－DA）进行荧光探针标记测定胞内ROS水平；免疫印迹法检测cleaved caspase－3和PARP－1蛋白表达。结果显示， NAC预处理可降低Tv ESP的细胞毒性作用。 Tv ESP作用SiHa细胞16 h后，细胞内ROS水平升高，但经过NAC预处理后胞内ROS生成显著降低。此外， NAC预处理后能显著下调Tv ESP诱导的cleaved caspase－3和cleaved PARP－1的表达水平。
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旋毛虫肌幼虫排泄分泌物激活的巨噬细胞和成肌细胞共培养对成肌细胞分化的影响
目的 体外研究与旋毛虫肌幼虫排泄分泌物(MLES)作用后的巨噬细胞共培养对成肌细胞分化的影响,为深入了解旋毛虫包囊形成机理提供新的思路.方法 通过共培养技术对旋毛虫ML ES激活的巨噬细胞与成肌细胞进行共培养,建立J774A.1 C2C12细胞共培养模型.细胞免疫荧光法以及Western blot分析与旋毛虫ML ES处理的巨噬细胞共培养对成肌细胞分化以及成肌调节因子表达的影响.结果 细胞免疫荧光以及Western blot表明,与对照组比较,成肌细胞与ML ES作用后的巨噬细胞共培养明显降低成肌细胞分化调节因子(MyoD、Myogenin)阳性细胞的数量及终末分化标记物MHC的表达.结论 旋毛虫ML ES可以直接通过调节巨噬细胞活性来影响成肌细胞的分化,为研究旋毛虫与宿主细胞及旋毛虫感染后,宿主细胞间相互作用复杂机制提供了新的思路.
