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胰岛素抵抗大鼠模型中同型半胱氨酸代谢关键酶的变化
目的 建立胰岛素抵抗(IR)的动物模型,探讨同型半胱氨酸的变化及同型半胱氨酸改变的分子机制.方法 20只6周健康SD大鼠随机分为正常对照组和胰岛素抵抗组.高脂高糖饮食加高脂灌胃3个月制造胰岛素抵抗模型,空腹状态下测定血液中同型半胱氨酸(Hcy)、葡萄糖(GLU)、胰岛素(INS)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)的浓度,计算胰岛素抵抗指数(INI);免疫组织化学、RT-PCR和Western blotting检测肝脏组织亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、胱硫醚合成酶(CBS)、蛋氨酸合成酶(MTR)表达的变化.结果 胰岛素抵抗组和正常对照组比较,空腹GLU、INS的浓度升高(P＜0.05),INI增加(P＜0.05),确定胰岛素抵抗模型建立成功;TG和Hcy浓度增加(P＜0.05),TC变化无统计学意义(P＞0.05);MTHER和CBS的免疫组织化学检查、mRNA及蛋白表达降低(P＜0.05),MTR的免疫组织化学检查、mRNA及蛋白表达无统计学意义(P＞0.05).结论 在胰岛素抵抗条件下,同型半胱氨酸浓度增加,可能与参加同型半胱氨转化的MTHER和CBS表达降低有关.
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不同年龄段H型高血压合并慢性心力衰竭患者血清Hcy合成相关酶MTHFR、CBS及MTR表达研究
目的 研究不同年龄段H型高血压合并慢性心力衰竭患者血液中同型半胱氨酸(Hey)合成关键酶甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、胱硫醚合成酶(CBS)和蛋氨酸合成酶(MTR)的表达特点.方法 2012年1月～2013年9月云南省第三人民医院心内科收治H型高血压合并慢性心衰患者64例,根据年龄分为三组:＜50岁为B组(7例),50～70岁为C组(44例),＞70岁为D组(13例);另选取30例体检健康人为正常对照组(A组).采用ELISA测定炎性因子、总抗氧化能力(T-AOC)和同型半胱氨酸(Hcy)含量,Western blot及RT-PCR半定量检测全血中MTH-FR、CBS和MTR mRNA及蛋白表达水平.结果 B组、C组及D组患者的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素-1(ET-1)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白介素-1α(IL-1α)、丙二醛(MDA)和Hcy明显高于A组,差异有统计学意义(P＜0.05);B组、C组以及D组的T-AOC、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)明显低于A组,差异有统计学意义(P＜ 0.05);RT-PCR以及Westem blot结果显示:B组、C组及D组患者血清中MTHFR、MTR表达明显低于A组,差异有统计学意义(P＜ 0.05);B组与C组的CBS表达相较A组降低,但差异无统计学意义(P＞0.05),D组CBS表达明显低于A组,差异有统计学意义(P＜0.05),D组MTHFR、MTR、CBS表达均明显低于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 H型高血压合并慢性心衰患者血清中Hcy含量与年龄有关,这可能是Hcy合成相关酶MTHFR及MTR表达水平降低造成.
关键词： 慢性心力衰竭 同型半胱氨酸 亚甲基四氢叶酸还原酶 胱硫醚合成酶 蛋氨酸合成酶 -
同型半胱氨酸水平和胱硫醚合成酶(CBS 844ins 68)基因多态性与冠心病的关系
目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)和胱硫醚合成酶(CBS 844ins 68)基因多态性与冠心病的关系.方法运用多聚酶链反应限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR)和荧光偏振法(FPLA)检测86例冠心病及143例对照组CBS基因多态性和血浆总Hcy水平.结果(1)冠心病病例组与对照组血浆Hcy分别为(16.83±4.20)μmo1/L和(9.97±2.43)μmol/L,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)病例组与对照组CBS基因分布频率和等位基因频数分布差异无统计学意义(P＞0.05).结论CBS 844ins 68多态性与冠心病无明显相关,高同型半胱氨酸血症与冠心病发生有一定关系.
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人参皂苷Rg1对NAFLD动物模型中同型半胱氨酸的调控机制
目的 建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的动物模型,探讨人参皂苷Rg1调控同型半胱氨酸的分子机制.方法 建立NAFLD动物模型,测定正常对照组和模型对照组空腹状态下的血清甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC),HE染色检测肝脏的形态学改变,油红“O”染色检测肝脏的脂质沉积.各组取血清检测同型半胱氨酸(Hcy)含量,免疫组化和Western blot检测肝脏组织内亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)和胱硫醚合成酶(CBS)蛋白表达的变化.结果 与正常对照组比较,模型对照组空腹TG和TC浓度增加(P＜0.05);HE染色显示肝细胞排列紊乱,出现脂肪变性;油红“0”染色显示肝脏组织的脂质沉积增加.与正常对照组比较,模型对照组的Hcy的浓度增加(P＜0.05),人参皂苷Rg1治疗后降低(P＜0.05),存在剂量依赖性;与正常对照组比较,模型对照组的MTHFR和CBS的蛋白质在肝脏组织中表达降低(P＜0.05).人参皂苷Rg1治疗后,MTHFR和CBS的蛋白质表达升高(P＜0.05),存在剂量依赖性.结论 在NAFLD模型中,人参皂苷Rg1可能通过增加肝脏组织的MTHFR和CBS表达,降低同型半胱氨酸的含量,从而对非酒精性脂肪肝病发挥保护作用.
