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长期吸烟对大鼠肺组织p53、K-ras蛋白表达和基因突变的影响
目的 观察长期吸烟对Wistar大鼠肺组织p53、K-ras表达的影响,研究吸烟与肺组织p53、K-ras基因突变的关系.方法 建立Wistar大鼠被动吸烟模型.72只雄性Wistar大鼠分为实验组和对照组,实验组被动吸烟6个月,对照组正常呼吸条件下饲养,每个月末分别取6只大鼠肺组织,免疫组织化学观察p53和K-ras蛋白表达情况,聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术检测p53第5、6、7～8外显子和K-ras第1外显子的突变情况.结果 免疫组织化学结果显示,p53蛋白表达于细胞核,K-ras蛋白表达于胞浆,吸烟组p53、K-ras蛋白表达强度与正常组比较有显著性差异.随着吸烟时间的增加,p53、K-ras蛋白阳性表达率均随吸烟时间的延长而升高.PCR-SSCP显示,p53基因随吸烟时间的延长突变率增加;K-ras基因突变率随吸烟时间延长增加不显著.结论 吸烟可以导致大鼠肺组织p53、K-ras蛋白表达增强和基因突变率增加,随吸烟时间的延长呈上升趋势,为吸烟对肺的组织基因突变的判定及吸烟者肺癌的早期诊断提供理论依据,具有重要的理论和应用价值.
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PCR-SSCP银染法检测吸烟大鼠肺组织p53、K-ras基因突变
目的 利用PCR-SSCP银染法检测不同吸烟时间段的大鼠肺组织p53、K-ras基因突变情况.方法 建立Wistar大鼠被动吸烟模型.利用PCR-SSCP法检测p53第5～8外显子、K-ras第1外显子在吸烟各阶段的突变情况.结果 p53基因突变率随吸烟时间的延长而增加(P＜0.05),并呈逐渐上升趋势,K-ras基因随吸烟时间的延长突变率增加不显著.结论 在吸烟所致肺癌的发生发展中p53基因的突变是早期事件,为通过筛选吸烟者痰液中脱落细胞中的p53基因突变进行肺癌的早期诊断提供了理论依据.
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E-选择素基因多态性与冠心病相关性研究
目的探讨E-选择素基因多态性与中国人群冠心病发病的关系.方法93例年龄≤60岁的冠心病患者和97例年龄性别匹配的非冠心病对照者,运用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和直接测序技术对E-选择素基因全部外显子及其两翼的部分内含子进行筛查.结果发现3个E-选择素基因多态性:2号外显子5'非翻译区存在G98→T所致的G98T多态性(G/T等位基因);4号外显子EGF结构域中存在A561→C所致的Ser128Arg多态性(A/C等位基因);11号外显子膜结构域中存在一个新的A1856→G所致的A1856G多态性(A/G等位基因).在冠心病组中,T和C等位基因频率显著高于对照组(P=0.01,P=0.03).结论T和C等位基因可能是中国人群中年龄≤60岁冠心病患者的遗传危险因素.
关键词： E-选择素基因 基因多态性 冠心病 聚合酶链式反应-单链构象多态性 -
人体膀胱尿路上皮癌中FGFR3与p53表达的相关性及临床病理意义
目的 探讨成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)与p53在人体膀胱尿路上皮癌中表达的相关性及临床病理意义.方法 采用手工显微切割方法、PCR-SSCP分析技术和免疫组织化学Elivision法,检测76例人体膀胱尿路上皮癌和8例正常膀胱黏膜组织石蜡标本中FGFR3基因点突变、FGFR3及p53蛋白的表达；分析FGFR3和p53的相关性及二者与临床病理参数之间的关系.结果 ①76例癌中分别扩增出FGFR3基因外显子Exon7、Exon10和Exon15,经PCR-SSCP检测,FGFR3总突变率为47.4％( 36/76)；各外显子所占比例:Exon7为61％(22/76),Exon10为30％(11/76),Exon15为9％ (3/76)；②76例癌中FGFR3和p53蛋白的阳性表达率分别为59.2％( 45/76)和30.3％ (23/76)；8例正常膀胱黏膜组织FGFR3与p53均无表达；③随着肿瘤病理分期与组织分级的增高,FGFR3的突变率和FGFR3蛋白的表达均逐渐降低,而p53蛋白的表达逐渐增高.结论 低分级与低分期的浅表性尿路上皮癌FGFR3高表达,高分级与高分期的浸润性尿路上皮癌p53高表达,提示FGFR3与p53可能介导了两条不同的膀胱癌发生发展途径.FGFR3与p53的联合检测,可有助于膀胱癌的病理分期与分级、判断预后及指导治疗.
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小儿脑胶质瘤P16基因的表达
目的检测20例小儿脑胶质瘤中P16基因及其蛋白的存在情况.方法用聚合酶链式反应-单链构象多态性分析和免疫组织化学技术检测了20例1～14岁小儿脑胶质瘤.结果显示P16基因和P16蛋白的丢失率分别为50%(1020)及(520).结论本文结果提示P16基因和蛋白缺失可能与部分小儿脑胶质瘤发生、发展有关.
关键词： p16基因 胶质瘤 免疫化学结构 聚合酶链式反应-单链构象多态性
