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利用基因芯片技术研究FGFR3在小鼠胚胎肢芽不同发育阶段的表达
目的 检测在软骨发育分化过程中具有重要作用的成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)在小鼠胚胎肢芽发育过程中的表达. 方法 采用小鼠全基因组Affymetrix mouse 430 2.0芯片检测小鼠胚胎肢芽发育不同阶段的基因表达,并进行组织学染色观察. 结果 FGFR3在E12.5d开始呈现明显的表达上调,在E13.5d达到上调顶峰,E14.5d后FGFR3表达逐渐下调. 结论 FGFR3的表达与胚胎肢芽软骨发育过程密切相关,在软骨的发育分化过程中发挥着重要的作用,并可作为前软骨细胞的特异件标记物.
关键词： 成纤维细胞生长因子受体3 软骨发育 基因芯片 小鼠 -
成纤维细胞生长因子受体3及p53蛋白表达与膀胱癌预后关系的研究
目的 探讨膀胱癌组织中成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)、p53蛋白表达及与膀胱癌预后的关系.方法 免疫组织化学法检测108例膀胱癌组织和8例正常膀胱黏膜中FGFR3和p53的表达.膀胱癌患者中男60例,女48例.年龄29～87岁.TNM分期Ta～T164例、T2～T4 44例.病理分级G130例,G249例、G329例.结合临床资料分析其与膀胱癌分期、分级、复发的相关性.Kaplan-Meier法和Cox回归分析法进行生存分析. 结果 108例膀胱癌组织FGFR3阳性表达59例(54.6%),其中Ta～T1肿瘤阳性表达率75.0%,T2～T425.0%;G1 70.0%、G2 57.1%、G334.5%;p53阳性表达48例(44.4%),其中Ta～T1 25.0%、T2～T4 72.7%;G1 36.7%、G2 34.7%、G369.0%.8例正常膀胱黏膜组织FGFR3、p53表达均为阴性.组间差异均有统计学意义(P＜0.01).Spearman等级相关分析表明FGFR3与p53表达不相关(P＞0.05).Kaplan-Meier法结果表明FGFR3阳性表达组较阴性表达组、p53阴性表达组较阳性表达组有较长的复发间期(P＜0.05).单因素Cox回归分析显示FGFR3表达缺失和p53过度表达与肿瘤分级分期显著相关(P＜0.05).多因素Cox回归分析表明,p53表达是膀胱癌预后的独立影响因素(OR=0.59,P=0.04).结论膀胱肿瘤组织中FGFR3蛋白过度表达及p53蛋白表达缺失提示患者预后较好.
关键词： 膀胱肿瘤 癌 成纤维细胞生长因子受体3 P53蛋白 预后 -
短肢畸形胎儿FGFR3基因突变分析
目的 对超声检查疑为短肢畸形的胎儿进行致病基因成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)全外显子突变分析产前基因诊断及遗传咨询.方法 从UCSC Genome Bioinformatics数据库中提取包括FGFR3基因全部17个外显子的2个转录本的相关序列作为标准序列,设计合成FGFR3全基因外显子扩增的共8对引物.收集2014年1月～2016年12月在河北北方学院附属第一医院就诊的5例疑为短肢畸形的胎儿,对高危胎儿于B超引导下行羊水穿刺,富集细胞,对FGFR3基因外显子组进行PCR扩增,应用Sanger基因测序技术进行FGFR3基因全外显子测序,采用CodonCode Aligner软件对测序结果进行错义突变位点分析,判断其是否存在致病突变.结果 5例疑为短肢畸形的胎儿,其中1例胎儿FGFR3基因(转录本NM_000142.4)第7号外显子(FGFR3-7-IS1)携带错义突变C.1138G＞A(P.Arg380Gly),其余4例未发现FGFR3基因突变.对明确了致病突变的5例孕早期胎儿家属进行遗传咨询.结论 对疑似短肢畸形胎儿应用基因测序技术进行产前FGFR3基因突变的检测可以预防短肢畸形患儿的出生.
关键词： 短肢畸形 软骨发育不全 成纤维细胞生长因子受体3 突变 产前诊断 -
成纤维细胞生长因子受体3和中枢神经系统发育
在胚胎发育过程中成纤维细胞生长因子调控细胞的增殖、迁移和分化,这些过程要通过激活其受体来完成[1],其中包括成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3).
关键词： 成纤维细胞生长因子受体3 发育 少突胶质细胞 -
成纤维细胞生长因子受体3突变与疾病
成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)在细胞的增殖、分化、血管形成、骨骼发育及与生长和发育相关的过程中起着十分重要的作用.本文概述了FGFR3突变与遗传性侏儒症、膀胱癌等肿瘤的发生和发展的关系.
关键词： 成纤维细胞生长因子受体3 骨疾病 肿瘤 -
软骨发育不全1例基因突变检测
目的 对1例临床诊断为软骨发育不全(achondroplasia,ACH)的患者及其父母的成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)进行基因突变检测.方法 提取患者及其父母外周血DNA,对FGFR3基因的第10外显子区设计引物,进行PCR扩增,并对扩增产物进行限制性内切酶酶切分析.结果 与父母及正常对照相比,此例患儿FGFR3基因第10外显子发生了第1138位G到A的点突变.结论 FGFR3基因第10外显子G1138A杂合突变可能为该例软骨发育不全患者的主要病因.该检测结果与国内外研究结果一致,进一步说明该突变为热点突变.
关键词： 软骨发育不全 成纤维细胞生长因子受体3 基因突变 -
先天性软骨发育不全一家系的基因诊断
目的研究一中国人先天性软骨发育不全(achondroplasia,ACH)家系成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)基因是否发生突变.方法对该家系中两名临床诊断为ACH的患者以及其他4名成员的DNA进行PCR,并将PCR扩增产物直接测序.结果测序显示两名患者存在FGFR3跨膜区1138位核苷酸G-A的转换突变,且均为杂合子.结论 FGFR3跨膜区1138位核苷酸G-A转换突变似为该ACH家系的主要发病原因.
关键词： 软骨发育不全 先天性 成纤维细胞生长因子受体3 突变 -
软骨发育不全患者的FGFR3基因诊断
目的 建立软骨发育不全(ACH)患者的FGFR3基因检测方法.方法 用PCR扩增和测序技术对临床上疑似ACH的14例患者的FGFR3基因突变进行测序.结果 FGFR3基因的外显子10测序结果显示,14例疑似ACH患者中10例检出FGFR3基因1138位G→A突变.对4例未检出突变的样本进行FGFR3基因的全部外显子测序,有2例样本检出FGFR3基因882位T→C杂合突变,后确定其为已知的单核苷酸多态性(SNP)位点(rs2234909).对4例样本中的l例进行了后续检查,证实该受检者不是ACH患者.结论 FGFR3基因的突变检测有助于疑似ACH患者的明确诊断,对遗传咨询具有重要意义.
关键词： 软骨发育不全 成纤维细胞生长因子受体3 基因诊断 -
一例致死性软骨发育不良胎儿的基因诊断
目的:建立一种致死性软骨发育不良的诊断方法.方法:采用聚合酶链反应-测序分析的方法,对1例超声提示致死性骨骼发育异常胎儿的成纤维细胞生长因子受体3(FGFR)基因上的R248C以及K650N位点的点突变进行检测.结果:在该例胎儿第15外显子1948位点发现了A到G的突变,导致TK2区第650位密码子赖氨酸被谷氨酸取代,从而导致Ⅱ型致死性发育不良.结论:产前基因诊断可快速、有效地对致死性软骨发育不良胎儿作出病因确诊和分型,防止患儿出生,真正实现优生.
关键词： 致死性软骨发育不良 成纤维细胞生长因子受体3 基因诊断 -
FGFR3在膀胱癌发生及靶向治疗中作用的研究进展
成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)是一种受体酪氨酸激酶,是导致膀胱癌、多发性骨髓瘤和宫颈癌等恶性肿瘤发生的癌基因.FGFR3突变、基因易位和重组、过表达都易导致FGFR3过度活跃,从而引发膀胱癌.单克隆抗体靶向野生型和突变型FGFR3能抑制膀胱癌细胞株和移植瘤的生长,部分酪氨酸激酶抑制剂也进入了临床试验阶段.将来FGFR3靶向药物有望用于膀胱癌的治疗.
关键词： 膀胱癌 成纤维细胞生长因子受体3 靶向治疗 -
先天性软骨发育不全家系成纤维细胞生长因子受体3基因突变检测与分析
目的 检测和分析-先天性软骨发育不全(ACH)家系6人成纤维细胞牛长因子受体3(FGFR3)基因突变.方法 根据知情同意原则采集该家系成员6人血样标本,并以2例健康人作对照.应用单链构象多态性-聚合酶链反应(PCR-SSCP)和限制性扩增片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测该家系各成员FGFR3基因3跨膜区1 138位核苷酸突变情况.结果 FGFR3基因1 138位核苷酸位点扩增产物SSCP方法显示,ACH家系中先证者及其父亲检测到单链泳动变位.且异常带型一致,家系中其他成员及健康人无单链泳动变位,进一步采用Sfe Ⅰ酶切后,先证者及其父亲检测到164 bp、109 bp和55 bp 3条片段,均存在FGFR3基因1 138位核苷酸G→A杂合性突变,而家系其他成员及2例健康人PCR产物酶解后只出现164 bp片段.该位点又采用Msp Ⅰ酶切,家系中所有成员及健康无关个体仅检测到一条带,大小为164 bp,即未发现D→C颠换突变.结论 FGFR3跨膜区1 138位核苷酸G→A转换突变可能为该家系ACH的主要发病原因.在该家系中,先证者父亲表现为新发突变,然后又遗传给其子导致ACH.
关键词： 软骨发育不全 成纤维细胞生长因子受体3 基因突变 家系 -
人体膀胱尿路上皮癌中FGFR3与p53表达的相关性及临床病理意义
目的 探讨成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)与p53在人体膀胱尿路上皮癌中表达的相关性及临床病理意义.方法 采用手工显微切割方法、PCR-SSCP分析技术和免疫组织化学Elivision法,检测76例人体膀胱尿路上皮癌和8例正常膀胱黏膜组织石蜡标本中FGFR3基因点突变、FGFR3及p53蛋白的表达；分析FGFR3和p53的相关性及二者与临床病理参数之间的关系.结果 ①76例癌中分别扩增出FGFR3基因外显子Exon7、Exon10和Exon15,经PCR-SSCP检测,FGFR3总突变率为47.4％( 36/76)；各外显子所占比例:Exon7为61％(22/76),Exon10为30％(11/76),Exon15为9％ (3/76)；②76例癌中FGFR3和p53蛋白的阳性表达率分别为59.2％( 45/76)和30.3％ (23/76)；8例正常膀胱黏膜组织FGFR3与p53均无表达；③随着肿瘤病理分期与组织分级的增高,FGFR3的突变率和FGFR3蛋白的表达均逐渐降低,而p53蛋白的表达逐渐增高.结论 低分级与低分期的浅表性尿路上皮癌FGFR3高表达,高分级与高分期的浸润性尿路上皮癌p53高表达,提示FGFR3与p53可能介导了两条不同的膀胱癌发生发展途径.FGFR3与p53的联合检测,可有助于膀胱癌的病理分期与分级、判断预后及指导治疗.
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人体正常涎腺组织中成纤维细胞生长因子受体3的表达
目的探讨成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)在人体正常涎腺组织中的表达情况.方法正常成人涎腺标本24例,其中腮腺、颌下腺和舌下腺标本各4例,唇腺、腭腺、磨牙后腺及舌腺各3例,分别用超敏S-P免疫组化法检测不同腺体组织中FGFR3的分布.结果在腮腺的浆液性腺泡的分泌颗粒及其他混合性腺的浆液性腺泡的分泌颗粒中均可见少量的FGFR3的表达,在大唾液腺及小唾液腺的小叶内导管和小叶间导管中均可见中等强度的FGFR3的表达,其中以颌下腺中表达较强,而在舌下腺中表达较弱,在间质结缔组织中均无FGFR3的表达.结论人体正常涎腺的导管系统中及浆液性腺泡中有FGFR3的表达.
关键词： 成纤维细胞生长因子受体3 涎腺 免疫组织化学 -
软骨发育不良一家系的FGFR3基因突变分析
目的 探讨一个中国汉族软骨发育不良家系的临床表型及FGFR3基因突变类型,确定其致病原因.方法 在获得知情同意后对该家系成员进行病史采集和临床检测,并对其中3例患者和3例正常亲属及家系外100例正常对照者采血进行DNA提取,采用聚合酶链反应结合DNA直接测序法对FGFR3基因的第10、13外显子及其部分内含子进行突变检测.结果 该家系中3例患者的临床表现为身材矮小、四肢过短、腰椎前突、头颅增大、前额突出.3例患者在FGFR3基因对应cDNA序列发现C1620A(N540K)杂合突变及第13内含子3′剪接位点上游23 bp处发现一G>A杂合突变,3例正常亲属及家系外100例正常对照者均未发现该两种突变.结论 FGFR3基因的N540K突变是导致该家系软骨发育不良的关键性分子病因,而内含子IVS13-23突变可能加重了患者的病情.
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RNA干扰成纤维细胞生长因子受体3基因对卵巢癌细胞增殖凋亡、免疫及NF-κB信号通路的影响
目的 探讨RNA干扰成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)表达对卵巢癌细胞增殖凋亡、B7-H1表达及NF-κB信号通路的影响.方法 采用LipofectamineTM2000将FGFR3 siRNA转染至人卵巢癌SK-OV-3细胞中,Western blotting检测细胞中FGFR3、B7-H1、p-NF-κB、p-IκB、cyclinD1和survivin蛋白的表达;CCK8检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 转染FGFR3 siRNA可明显降低FGFR3、B7-H1、p-NF-κB、cyclinD1和survivin的蛋白表达,增加p-IκB的蛋白表达,抑制细胞活力,诱导细胞凋亡.结论RNA干扰卵巢癌FGFR3表达可降低癌细胞活力,诱导细胞凋亡,降低免疫逃逸相关基因B7-H1表达,其机制可能与下调NF-κB信号通路有关.
关键词： 成纤维细胞生长因子受体3 卵巢癌 凋亡 免疫 NF-κB信号通路 -
小鼠FGFR3可控性RNAi载体的构建和抑制效率验证
目的 构建小鼠成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)可控性RNAi载体及RNAi载体,并在体外验证后者效率.方法 以含有pLoxPneo基因的pBSK/U6载体为骨架,首先构建针对FGFR3的可控性RNAi载体pBSU6/FGFR3i,然后经Cre重组酶去除neo基因后得到RNAi载体FGFR3-RNAi.将FGFR3-RNAi与FGFR3表达载体分别共转染RAW264.7和HEK293T细胞株,经半定量RT-PCR和Western blot分别检测FGFR3 mRNA和蛋白表达情况.结果 成功构建针对FGFR3的可控性敲低载体和RNAi载体;FGFR3载体在细胞水平可明显降低FGFR3 mRNA的丰度及蛋白表达.结论 为进一步获得FGFR3可控性敲低的小鼠模型奠定基础.
关键词： 成纤维细胞生长因子受体3 RNAi 可控性敲低 -
一个软骨发育不全家系成纤维细胞生长因子受体3基因突变分析
目的基因水平上澄清一个不符合常染色体显性遗传病遗传规律的软骨发育不全家系患者的致病机理. 方法用聚合酶链反应技术扩增家系成员外周血基因组DNA成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3, FGFR3)基因第10外显子,DNA序列分析寻找突变位点,然后经限制性内切酶MaeⅢ分析验证. 结果患者外周血基因组DNA FGFR3基因第10外显子第1180位核苷酸发现一个A→T新突变,而家系正常成员包括先证者父母不存在此突变. 结论结合系谱分析,这一新突变可能是导致该家系患者软骨发育不全的原因.
关键词： 基因突变 先天性软骨发育不全 成纤维细胞生长因子受体3 生殖细胞嵌合 -
先天性软骨发育不全成纤维细胞生长因子受体3基因1138位核苷酸点突变的检测
目的验证成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3, FGFR3)跨膜区1138位核苷酸为先天性软骨发育不全突变热点及用变性梯度电泳方法筛查的效果.方法对17例临床诊断为先天性软骨发育不全患者进行基因组DNA聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)分析,并用变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE)进行其它突变位点的筛查. 结果 17例患者中14例RFLP检测显示能被SfcⅠ酶切,提示存在1138位核苷酸G→A的转换,且均为杂合子.17例用MspⅠ酶切均阴性,提示无G→C的颠换.DGGE方法的筛查中,酶切阳性的14例标本均显示存在杂合型突变.3例PCR-RFLP检测阴性的标本未显示突变位点,提示在该扩增区域确实不存在突变位点. 结论 FGFR3跨膜区1138核苷酸G→A的突变是软骨发育不全的主要发病机理,DGGE可作为筛查某一区域基因突变的敏感而可靠的检测手段,尤其是对杂合子的检测.
关键词： 成纤维细胞生长因子受体3 跨膜区 基因 突变 先天性软骨发育不全 -
FGFR3基因突变分析鉴别软骨发育不全及类似遗传性侏儒
目的 了解中国人软骨发育不全患者(achondroplasia, ACH)的基因突变情况,建立一种快速简便的从分子水平鉴别ACH及类似遗传性侏儒的方法.方法 对21例ACH患者及6例疑似ACH患者的干血滤纸片进行成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3, FGFR3)基因跨膜区特异性扩增,通过限性内切酶分析、单链构象多态和变性梯度凝胶电泳检测基因突变.结果 6例疑似ACH患者中,1例为ACH,5例为假性软骨发育不全.22例ACH患者中,21例发生了FGFR3基因1138位核苷酸G→A的转换,1例发生了1138位G→C的颠换.结论 中国人ACH患者的基因突变与FGFR3基因1138位核苷酸G→A和G→C的突变密切相关.该法是一种快速简便地从分子水平鉴别ACH及类似遗传性侏儒的方法.
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软骨发育不全FGFR3基因突变的研究
目的 了解中国人软骨发育不全患者成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)基因变异情况.方法 应用PCR-SSCP和限制性内切酶酶切方法,分析辽宁地区7例软骨发育不全(achondroplasia,ACH)患者外周血DNA标本中FGFR3基因第10外显子区域.结果 7例患者均检测到相同的G380R点突变.结论 表明G380R为中国人ACH患者常见突变.应用PCR-SSCP和限制性内切酶酶切的方法检测FGFR3基因突变是产前诊断和早期诊断ACH患者的简便、快速、可靠的手段.
关键词： 软骨发育不全 成纤维细胞生长因子受体3 聚合酶链反应 单链构象多态性
