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核糖核酸酶抑制因子与整合素连接激酶的相互作用以及对体外血管生成的影响
目的 研究核糖核酸酶抑制因子(RI)与整合素连接激酶(ILK)的相互作用以及对体外血管生成的影响.方法 用LV5-RNH1 homo、LV5NC、pCMV-3 × flag-ILK和pCMV-3×flag分别转染EJ细胞后,筛选稳定转染细胞系,分为EJ-RI、EJ-LV5、EJ-ILK、EJ-FLAG和EJ组;构建ILK与红色荧光蛋白融合表达载体YFP-ILK,与CFP-RI质粒共转染293细胞和EJ细胞,用荧光显微镜观察RI和ILK蛋白在细胞内的共定位;构建真核表达质粒pCMV-3×flag-ILK,用GST蛋白沉降技术检测RI和ILK蛋白在体外的结合作用;用免疫共沉淀(Co-IP)实验检测蛋白RI和ILK在真核细胞内的结合作用;用小管形成实验探索RI和ILK的相互作用对体外血管形成的影响.结果 真核表达载体YFP-ILK和pCMV-3×flag-ILK构建成功;细胞内绿色荧光蛋白融合表达的RI和红色荧光蛋白融合表达的ILK在荧光显微镜下存在共定位现象;RI和ILK蛋白在原核细胞反应体系中存在相互作用;RI和ILK蛋白在真核细胞反应体系内也存在相互作用;RI和ILK的相互作用能抑制血管生成(P＜0.05).结论 RI和ILK蛋白在原核细胞防御体系和真核细胞反应体系中均存在相互结合作用,并对体外血管生成有抑制作用.
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Bcl-2与ILK蛋白在子宫平滑肌肿瘤中的表达及意义
目的:探讨Bcl-2和ILK蛋白在子宫平滑肌肿瘤(USMTs)中的表达和意义.方法:对20例良性子宫平滑肌瘤(UL)、18例子宫平滑肌肉瘤(LMS)及70例交界性子宫平滑肌瘤(BLM)[包括40例富于细胞型子宫平滑肌瘤(CL)、13例奇异型子宫平滑肌瘤(BL)、4例核分裂活跃型子宫平滑肌瘤(ML)、10例不典型子宫平滑肌瘤(AL)及3例恶性潜能未定型子宫平滑肌瘤(STUMP)]应用免疫组织化学法检测Bcl-2和ILK蛋白的表达.结果:UL组Bcl-2蛋白表达阳性率明显高于LMS组(P＜0.05);BLM组Bcl-2蛋白表达阳性率显著高于LMS组(P＜0.01);LMS组ILK蛋白表达阳性率显著高于UL组(P＜0.01)和BLM组(P＜0.01).结论:Bcl-2和ILK蛋白的过度表达可能在ULMTs的发生、发展中起重要作用.
