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伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)文献资料
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姜黄素对鼻咽癌细胞系CNE-1 RECK基因表达及甲基化的影响
目的 探讨姜黄素对鼻咽癌细胞RECK基因表达及甲基化的影响,并探讨可能的机制.方法 体外培养鼻咽癌细胞系CNE-1,用1、10和30 μmol/L姜黄素处理后,用Western blot和实时定量PCR分别检测RECK基因以及DNA甲基化酶1(DNMT1)的蛋白和mRNA表达;高效液相色谱-电喷雾质谱检测RECK甲基化,同时用MTT检测CNE-1细胞增殖,EMSA法检测核转录因子Sp1的DNA结合活性.结果 CNE-1细胞未刺激时RECK表达水平较低,而经1～30 μmolL姜黄素处理后,能显著增强RECK蛋白和mRNA的表达(P＜0.05).30 μmol/L姜黄素处理CNE-1细胞后,RECK启动子甲基化水平降低至31％ (P ＜0.05),全基因组甲基化水平降低39％ (P ＜0.05),细胞系的甲基化活性减少了72％ (P ＜0.05).同时,姜黄素能显著降低CNE-1细胞中DNMT1的蛋白和mRNA表达(P＜0.05),也能减低CNE-1细胞的存活率(P＜0.05).EMSA结果显示,姜黄素处理后,CNE-1细胞中Sp1的DNA活性显著降低.结论 姜黄素可能通过上调RECK基因表达,降低细胞内甲基化水平,从而抑制CNE-1细胞生长.
