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骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化过程中miR130α的表达
目的 诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化,初步探索miR130α在骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化过程中的调控作用.方法 体外TGF-β1诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化,免疫荧光法和免疫组化染色鉴定Ⅱ型胶原,阿辛兰染色鉴定氨基葡聚糖.用Real-time PCR法检测细胞miR130α的表达.结果 骨髓间充质干细胞在TGF-β1诱导下可分化为软骨细胞.培养7 d后,诱导培养组细胞miR130α表达的水平显著低于培养前的水平(P＜0.05).结论 骨髓间充质干细胞体外诱导可以分化为软骨细胞,在向软骨细胞分化的早期,miR130α表达降低伴随着软骨细胞的分化,提示与软骨形成的过程有关.
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骨髓间充质干细胞对放射性脊髓损伤的作用
1病因、病理发病机制随着放射治疗学的发展,放疗成为治疗肿瘤的主要手段之一,同时因射线所致损伤也越来越多,有一部分病人不是死于肿瘤,而是死于放射损伤.
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小鼠骨髓间充质干细胞的体外培养和鉴定
目的 采用全骨髓贴壁培养法分离和体外培养小鼠骨髓间充质干细胞,并通过形态学现察和排除鉴定法进行初步鉴定.方法 无菌分离小鼠胫骨和股骨,剪开骨干骺端,用RPMI 1640培养基反复液冲洗骨髓腔,收集并过滤离心.DMEM-LG培养基重悬细胞,将细胞悬液转入0.1%明胶包被的培养瓶中,37℃,5%CO2常规进行原代培养并传代.在培养过程中,取不同代数的细胞做CD45流式标记鉴定.结果 采用全骨髓贴壁培养法获得的骨髓间充质干细胞贴壁时间短,增殖快,经传代后能够纯化.第4-5代骨髓间克质干细胞形态单一均匀,呈典型的极性漩涡状生长,并不表达白细胞标志抗原CD45.结论 本实验可稳定获得均质性良好的小鼠骨髓同充质干细胞,并初步通过鉴定.
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大鼠骨髓间充质干细胞与成纤维细胞差异蛋白质组学研究
目的:进行大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)与成纤维细胞(FBs)细胞的蛋白质组学研究,寻找出重要的差异蛋白质.方法:采用二维电泳的方法(2DE)分别分离两种细胞的蛋白质,用PDQuest软件分析蛋白表达差异,并采用质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定.结果:发现了MSCs和FBs之间存在差异表达的15种蛋白质,其中4种蛋白质差异显著且与细胞功能密切相关,即SM22-α、乌嘌呤脱氨基酶(Guanine deaminase,GD)、膜联蛋白(Annexin A5)、过氧化物岐化酶-2(superoxide dismutase 2,SOD-2).MSCs的SM22-α和Annexin A5的表达分别比FBs低26倍和8倍,而MSCs的GD和SOD-2表达分别比FBs高16倍和21倍.结论:与大鼠FBs相比,MSCs存在更多防止细胞损伤相关的蛋白质和更少的与细胞衰老过程密切相关的蛋白质,具有高分化潜能,更适合于作为组织工程种子细胞.
