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CYP19增强脱氢表雄酮抑制高脂诱导的兔主动脉及人脐静脉内皮细胞MMP-9的表达
目的 探讨脱氢表雄酮(DHEA)抗动脉粥样硬化(AS)的作用及其机制.方法 将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为对照组、ox-LDL组(30 mg/L ox-LDL)、DHEA(低或高浓度)干预组(30 mg/L ox-LDL+0.1或1μmol/L DHEA)、DHEA+全反式维甲酸(ATRA)干预组(30 mg/L ox-LDL+1μmol/L DHEA+0.01μmol/L ATRA)及DHEA组(1μmol/L).用real-time PCR和ELISA检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA及蛋白的表达.通过脂质体介导的方法将pcDNA3.1-CYP19-GFP真核表达质粒(细胞色素P450芳香酶基因)及pcDNA3.1-GFP空质粒分别转染至HUVEC,给予ox-LDL诱导及DHEA干预,用real-time PCR和ELISA检测转染细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达.将兔分为对照组、高脂组(口服1％胆固醇和3％猪油)、DHEA干预组(口服0.27％DHEA)、DHEA+ATRA干预组[口服0.6 mg/(kg·d)ATRA]及单DHEA组.用real-time PCR和免疫组织化学法检测兔主动脉MMP-9 mRNA及蛋白的表达.结果 ox-LDL组HUVEC MMP-9的表达较对照组明显升高(P<0.05);DHEA干预组呈浓度依赖性使MMP-9的表达明显回降(P<0.05).高脂组兔主动脉MMP-9的表达较对照组明显升高(P<0.05);DHEA干预组能明显缓解高脂组的变化(P<0.05).CYP19+ox-LDL+DHEA组较空质粒+ox-LDL+DHEA组MMP-9的表达显著降低(P<0.05).结论 DHEA能抑制高脂诱导的兔主动脉及HUVEC MMP-9的表达,过表达细胞色素P450芳香酶基因(CYP19)能增强此作用.
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脱氢表雄酮通过抑制高脂诱导的巨噬细胞炎性蛋白-1α抗动脉粥样硬化的机制
目的:探讨脱氢表雄酮(DHEA)是否通过抑制高脂诱导的巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)的表达发挥抗动脉粥样硬化(AS)作用,以及细胞色素P450芳香酶基因(CYP19)对DHEA的作用. 方法:氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC),给予DHEA、全反式维甲酸(ATRA)干预;pcDNA3.1-CYP19-GFP真核表达质粒及pcDNA3.1-GFP空质粒分别转染HUVEC,给予ox-LDL诱导及DHEA干预.实时荧光定量PCR和细胞酶联免疫吸附法检测各组HUVEC及各组转染细胞MIP-1α mRNA及蛋白的表达.高脂饮食建立AS兔模型,给予DHEA、ATRA干预,实时荧光定量PCR和免疫组织化学法检测兔主动脉MIP-1α mRNA及蛋白的表达. 结果:ox-LDL诱导的HUVEC的MIP-1α表达显著升高,给予DHEA干预后,MIP-1α的表达明显回降(P均＜0.05),同时给予ATRA干预对DHEA抑制MIP-1α的表达无明显影响.喂饲高脂饲料的大耳白兔,主动脉MIP-1α表达显著升高,而在高脂饲料中添加DHEA后,MIP-1α的表达明显回降(P均＜0.05),同时添加ATRA对DHEA抑制MIP-1 α的表达无明显影响.经ox-LDL诱导及DHEA干预后,转染CYP19质粒的HUVEC MIP-1α的表达较转染空质粒的HUVEC显著降低(P＜0.05). 结论:DHEA能够抑制高脂诱导的HUVEC和兔主动脉MIP-1α的表达,发挥抗AS作用;CYP19能够增强DHEA的作用.
