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在癌细胞中下调皮质肌动蛋白使细胞内吞作用减弱
目的 探讨皮质肌动蛋白(Cort)对高表达Cort的乳腺癌细胞系(MDA-MB-231细胞)细胞内吞作用的影响.方法 在MDA-MB-231细胞中使用Cort siRNA干预技术和"生物搬运法"系统将抗Cort免疫抗体(Cort多克隆抗体001或单克隆Cort抗体4F11)引入MDA-MB-231细胞,进行体内干预Cort功能.根据捕获ELISA法分析转铁蛋白摄入,免疫印迹分析细胞中Cort敲除的程度和免疫荧光直接检测评价Cort在转铁蛋白吸收中的作用.结果 免疫印迹分析在Cort siRNA处理过的细胞质中未测出Cort蛋白;用荧光标记评价转铁蛋白密度水平,在Cort siRNA处理的细胞中要低于含相对高水平Cort的对照组细胞;在接受Cort siRNA处理后仅50%的MDA-MB-231细胞中有转铁蛋白摄入;在MDA-MB-231细胞中引入001或4F11抗体,其细胞的内吞作用减弱,导致明显的转铁蛋白吸收减少30%～60%.结论 干扰Cort的功能或直接使用抗Cort抗体进行干预都能抑制细胞内吞作用.Cort的是细胞内吞作用中必不可少的成分,具有重要作用.
关键词： 皮质肌动蛋白(Cort) 细胞内吞作用 siRNA 转铁蛋白 -
人肺腺癌细胞SPC-A1对氨基硅烷纳米Fe3O4内吞途径及机制的初步研究
目的:探讨氨基硅烷纳米Fe3O4进入到人肺腺癌细胞SPC A1的内吞途径及其机制.方法:在不同温度及细胞松弛素B处理前后对人肺腺癌细胞SPC-A1进行培养,通过透射电镜动态观察细胞对氨基硅烷纳米Fe3O4的不同内吞情况.结果:氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒与SPC-A1细胞在低温条件混合培养时可阻断氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒进入细胞质,而以静电作用的方式吸附于SPC-A1细胞膜表面.然而,当处于37℃条件培养时可激活细胞内吞作用,纳米颗粒首先进入细胞表面包被小窝、通过内吞体进入溶酶体.但经采用细胞松弛素B处理后,可导致37℃培养的SPC-A1细胞无法内吞纳米颗粒.结论:氨基硅烷纳米Fe3O4系通过细胞吞噬途径而进入细胞质,Fe3O4纳米颗粒有可能作为一种研究细胞内吞的示踪剂.
