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壳聚糖-镁膜与PCI2细胞在体外的生物相容性
目的 研究壳聚糖镁膜与PC12细胞体外生物相容性,初步探讨壳聚糖/镁复合物作为组织工程材料的可行性.方法 合成壳聚糖-镁膜,应用扫描电镜观察复合膜的表面形态,并用X线能谱仪分析壳聚糖-镁复合膜中镁的含量;在体外将复合膜与PC12细胞共培养,用MTT方法 检测细胞活力.光镜及扫描电镜观察PC12细胞在材料上的形态学变化.结果单纯壳聚糖(CS)与壳聚糖镁膜(CM)组相比,前者表面较为光滑致密,而复合膜中可见均匀排列的小孔;络合物中镁元素的含量与投入的硫酸镁量呈一定的剂量依赖.形态学观察表明,PC12细胞在CM上生长良好,至7 d时,可见微绒毛丰富并有较长突起,部分细胞之间形成突触状结构;MTT检测结果表明,培养5 d后实验组细胞活力超过对照组(P<0.05).结论 壳聚糖/镁膜与PC12细胞在体外有良好的生物相容性.
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纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶复合微球的制备及性能
背景:羟基磷灰石与高分子复合材料作为组织工程材料的报道很多,但多为粉体材料或块状材料,用于修复治疗时均存在一定的局限件.目的:制备纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶复合缓释微球,观察其体外释药特性.设计、时间及地点:重复测域设计,于2008-01/10在北京工业大学材料科学与工程学院生物功能高分子实验室完成.材料:纳米羟基磷灰石、壳聚糖、明胶、庆大霉素.方法:利用微波辅助法,在pH=7的条件下,制备了针状羟基磷灰石.采用W/O型复乳化-交联技术制备纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶载药复合微球.主要观察指标:①纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶复合微球的表面形貌、粒径分布.②载药复合微球的载药量、包封率及药物累积释放率.结果:①纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶载药复合微球形态均匀,其粒径主要集中在10-30μm,壳聚糖-明胶对羟基磷灰石形成了很好的包覆.②复合微球平均载药量32.97%,平均包封率49.20%,在3 d内对庆大霉素的释放达到88%左右.结论:所制各的纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶载药复合微球形态均匀,粒径分布窄,再分散性好,3d内能维持有效的约物浓度.
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壳聚糖体外促进ADP诱导入血小板聚集作用及其机制
为了观察壳聚糖溶液在有无诱导剂二磷酸腺苷(ADP)存在的条件下对人血小板聚集的影响,通过体外聚集实验,用比浊法检测富含血小板的血浆(PRP)及洗涤后血小板的聚集率,用ELISA的方法对人血小板聚集后释放的产物P-选择素(P-selectin)、血栓素B_2(Thromboxane B_2,TXB_2)进行含量测定;加入低剂量的ADP进行诱导并用抗体SZ-21对ADP途径进行封闭,从而确定壳聚糖是否通过ADP途径引起轿小板的聚集.结果显示,在无诱导剂的情况下,壳聚糖能够引起血小板的聚集(P<0.01),聚集后的产物能释放出大量的活性物质P-selectin、TXB_2(P<0.01);加入低剂量诱导剂ADP后,聚集效果更加明显(P<0.01),封闭ADP途径后,加入壳聚糖溶液不能够引起血小板聚集.以上实验结果提示壳聚糖能够促进血小板的聚集,并释放出活性物质,且与ADP起协同作用.说明壳聚糖引起血小板聚集足通过ADP途径起作用的,这也可能是其止血的机理之一.
