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TRAF2在人B淋巴细胞AP-1信号传导系统中的作用
目的 利用人B细胞株模型探讨TRAF2在调控AP-1信号系统中的作用.方法 将融合有黄色荧光素(YFP)的野生型(WT-TRAF2)或功能缺失型(DN-TRAF2)TRAF2质粒,以及小干扰RNA-TRAF2质粒转染至人类B淋巴细胞株,过夜培养后经流式细胞仪或抗生素G418筛选阳性转染细胞,通过Western blot、ELISA等方法研究TRAF2对AP-1通路中ERK、JNK、P38磷酸化和AP-1亚单位的细胞核内转移等的影响.结果 B细胞过度表达WT-TRAF2可增加ERK和P38的磷酸化水平以及C-FOS的核内转录,而过度表达DN-TRAF2或转染小干扰RNA-TRAF2则减少ERK和P38的磷酸化水平以及C-FOS的核内转录.结论 TRAF2可选择性地作用于人B淋巴细胞AP-1信号传导系统中的部分激酶,对B细胞AP-1信号系统的活化有重要作用.
关键词： 人B淋巴细胞 肿瘤坏死因子受体相关因子2 AP-1信号通路 -
TRAF6在B淋巴瘤细胞系NF-κΒ和AP-1信号传导通路中的作用
目的 利用人B淋巴瘤细胞系模型探讨TRAF6在调控NF-κΒ和AP-1信号系统中的作用.方法 将融合有黄色荧光素(YFP)的功能缺失型TRAF6(DN-TRAF6)质粒和小干扰RNA-TRAF6质粒转染至人类B淋巴细胞系,过夜培养后经流式细胞仪或C-418筛选阳性转染细胞,通过Western blot、ELISA等方法 研究TRAF6对NF-κΒ通路中IκBα磷酸化和转录因子(P65,P50和c-Rel)向细胞核内转移以及AP-1通路中ERK、JNK、P38磷酸化和转录因子(C-FOS,C-JUN,ATF和CREB)向细胞核内转移等的影响.结果 B细胞过度表达DN-TRAF6或转染小干扰RNA-TRAF6均可抑制IκBa和JNK的磷酸化水平以及P65、P50、c-Rel和c-Fos、C-JUN的核内转录.结论 TRAF6可选择性地作用于人B淋巴细胞的NF-κΒ和AP-1信号传导系统中部分激酶,在上述两条信号系统活化中起重要作用.
