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猪苓与蜜环菌化学成分研究的相关分析进展
共生的猪苓Polyporus umbellatus与蜜环菌Armillaria mellea均为药食兼用真菌,具有降血糖、调节免疫、抑制肿瘤等多种生物活性.猪苓菌核经菌丝体发育而来,其生长过程与共生蜜环菌有关;受其侵染,猪苓菌丝体可形成菌核.该文通过分析猪苓菌丝体、菌核和蜜环菌的化学成分,发现三者均含有甾体和含氮杂环等化合物,且猪苓菌核与蜜环菌中还含有三萜类次生代谢产物.猪苓菌核及其菌丝体的甾体种类存在显著差异,但部分成分存在一定的相关性.此外,猪苓菌核还特有长链脂肪酸、酰胺和苯酚等多种化合物,推测这些可能是因蜜环菌入侵而形成的多种次生代谢产物;而蜜环菌自身主要产生倍半萜、二萜等物质.猪苓与蜜环菌的化合物含量、种类与其共生繁殖密切相关,目前尚需对二者的共生机制进行深入研究,为提高二者产量及质量提供科学依据.
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药用真菌猪苓共生的蜜环菌种类研究
目的 对国内猪苓产区与猪艺苓共生的蜜环菌种类进行探究.方法 经PDA平板培养后长出健壮的蜜环菌根状菌索.运用IGS测序技术对分离的22株蜜环菌菌株的纯培养菌种进行分子鉴定,并基于蜜环菌的IGS序列进行核酸序列数据库GenBank 同源序列比对、构建系统发育树.结果 本实验获得的猪苓菌核组织分离的22株蜜环菌菌株为其纯培养菌种.基于IGS的系统发育分析表明,与猪苓菌核共生的蜜环菌分别属于Armillaria cepistipes,A.gallica,A.ostoyae以及A.mellea4个种,其中A.cepistipes,A.gallica分别分离得到10株,为优势种.结论 猪苓共生对蜜环菌物种专一性较低,与相关书籍及文献报道的与猪苓共生蜜环菌为单一A.mellea种的结论不符.与猪苓共生的蜜环菌多样性及不同种类蜜环菌对猪苓菌核生长发育的影响需进一步研究.
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猪苓菌丝形成菌核栽培方法的研究
目的阐明在伴生菌的作用下,不同栽培方法对猪苓菌丝形成菌核的影响.方法以树棒为载体,粗砂为基质,纯猪苓菌种、纯猪苓菌丝形成菌核伴生菌和蜜环菌为供试菌株,采用花盆栽培方法.结果猪苓菌种和伴生菌间隔接种于树棒鱼鳞口和晚期接蜜环菌有利于猪苓菌核的形成和生长.结论伴生菌是猪苓菌丝形成菌核的
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与蜜环菌共生过程中猪苓菌核不同部位糖类成分的含量研究
目的通过猪苓菌核与蜜环菌共生过程中不同部位糖类成分的含量测定,明确蜜环菌对猪苓菌化学成分的影响,为进一步阐明二者的相互作用关系和指导猪苓菌核的合理采收提供科学依据.方法采用高效液相分析法(HPLC).结果蜜环菌侵染的猪苓菌核部位和4年生菌核糖类成分含量高于其它部分.结论蜜环菌的侵染不但促进了猪苓菌核的繁殖和生长,而且对猪苓菌核糖类成分含量的提高也有显著作用.
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药用真菌猪苓菌核无机磷酸盐转运蛋白基因的分子克隆与特性分析
目的 克隆猪苓Polyporus umbellatus菌核无机磷酸盐转运蛋白基因并进行生物信息学和表达模式分析.方法 采用RT-PCR技术从猪苓菌核中克隆得到1个无机磷酸盐转运蛋白(inorganic phosphate transporter)基因,利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域、信号肽和跨膜结构等分子特性;采用Clustal W2以及MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;实时荧光定量PCR分析基因表达模式.结果 猪苓无机磷酸盐转运蛋白基因命名为PuPiT (NCBI登录号:KU179154).该基因开放读码框全长为1 590 bp,编码530个氨基酸.PuPiT蛋白相对分子质量为57 552,等电点6.82.氨基酸序列分析表明,PuPiT蛋白具有12个跨膜区.氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示PuPiT与Moniliophthora rorer亲缘关系近,与Moniliophthora roreri、双色蜡蘑Laccaria bicolor、Heterobasidion irregulare有较高的同源性,荧光定量PCR结果表明,PuPiT在与蜜环菌共生的猪苓菌核及未与蜜环菌共生的菌核中都有表达,其中共生部分的表达量显著上调,约是未共生部位的12倍,说明其参与猪苓与蜜环菌共生过程.结论 PuPiT基因克隆和分子特征为进一步研究揭示其在猪苓菌核磷元素转运及与蜜环菌共生过程中的调控作用奠定基础.
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人工诱导猪苓子实体形成的实验观察
目的 观察人工诱导猪苓菌核形成子实体的过程及其相关环境因子,为猪苓孢子繁育技术研究奠定基础.方法 根据多年观察猪苓菌核在自然环境下偶然形成子实体的生物学特性,模拟相关因子,按不同菌龄、菌核大小、是否伴栽密环菌等进行人工诱导猪苓形成子实体的实验观察.结果 人工模拟环境下,猪苓菌核在环境温度20～25℃、土壤湿度50%以上时,易形成子实体;其中形成子实体的主要是三年或三年以上生菌核,而三年以下生菌核很少形成子实体.结论 人工模拟环境可以诱导猪苓菌核产生子实体,但对菌核形成子实体的形态与菌核大小、菌龄长短等深层机理,尚需进一步研究.
