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柴胡注射液体外抑制PGE2释放的生物活性测定法
目的:建立rrIL-1β体外干扰下丘脑神经细胞释放PGE2离体模型,考察柴胡注射作用下该模型中PGE2含量与药物作用浓度的相关性.方法:体外培养下丘脑神经细胞,加入rrIL-1β(40 μg·L-1)刺激并于不同时间点收集细胞液,ELISA法检测各时间点收集的细胞液中PGE2含量;体外培养下丘脑神经细胞,加入rrIL-1β刺激后,各组加入不同浓度柴胡注射液,ELISA法检测细胞上清液中PGE2含量变化,分析加样浓度与对PGE2抑制率的线性关系.结果:rrIL-1β能刺激体外培养的下丘脑神经细胞释放PGE2,并在10 h时达到峰值;柴胡注射液能够显著干扰离体模型中PGE2的释放(P＜0.01,P＜0.05),且干扰作用与柴胡注射液作用浓度呈一定的线性相关(r =0.911,P＜0.01).结论:rrIL-1β能够干扰体外培养的下丘脑神经细胞释放PGE2,且对PGE2的抑制生成作用与药物浓度相关性较好.
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基于抑制血小板聚集活性检测的血栓通胶囊质量控制研究
通过建立血栓通胶囊(XST)体外抑制血小板聚集的生物活性测定法用于补充其质量控制方法.以体外抑制大鼠血小板聚集作用来考察血栓通胶囊的生物活性.以三七总皂苷、注射用血塞通冻干粉作为标准对照物质进行效价测定.研究结果发现血栓通胶囊对凝血酶诱导的血小板聚集具有显著抑制作用,并且呈现出剂量依赖关系.注射用血塞通冻干粉比三七总皂苷对照品体外抗血小板活性更稳定,适宜作为标准对照物质.采用“量反应平行线”法作为血栓通胶囊体外抗凝血酶诱导血小板聚集的生物效价检测方法,重复性较好(RSD 2.9％),样品检测结果均能通过可靠检验(偏离直线P＞0.05,偏离平行P＞0.05).该研究建立的生物效价检测方法可以作为血栓通胶囊生物评价的质控方法之一.
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益心通络胶囊体外抗凝血的生物活性测定法研究
目的 考察以凝血酶时间(TT)为反映体系建立益心通络胶囊体外抗凝血的生物活性测定法的可行性.方法 将不同浓度的益心通络胶囊浸提液加入兔血浆中,测定凝血酶时间(TT),观察益心通络胶囊浸提液浓度与TT值的量效关系.规定浓度为0.261 g/mL的益心通络胶囊溶液使空白血浆(加0.9％生理盐水)凝血酶时间延长1个百分点定义为1个效价单位(U),定义并测得益心通络胶囊标准品效价.结果 当益心通络胶囊浸提液在0.1886 ～0.2610 g/mL浓度范围内时,凝血酶时间与浓度线性较好(r=0.9980;0.9985;0.9829);测得益心通络胶囊标准品的效价为2395 U/g.结论 益心通络胶囊体外凝血酶时间的生物活性测定方法具有可行性.
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舒血宁注射液体外抑制血小板聚集的生物活性测定法
目的 建立舒血宁注射液(银杏叶提取物)体外抑制血小板聚集的生物活性测定法用于补充其质量控制方法.方法 以抑制家兔血小板聚集作用来考察显示舒血宁注射液量效关系和效价测定.结果 舒血宁注射液对凝血酶和胶原诱导的血小板聚集无明显的抑制作用,效价测定为100 U/mL.结论 舒血宁注射液抑制血小板聚集的生物活性测定法可靠,重复性良好,稳定性较好,可作为质量控制.
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中药生物活性测定法中标准品建立的研究
本文阐述中药生物活性测定法中标准品建立的意义及重要性,提出中药标准品建立的思路及发展方向.对现有中药标准品研究的发展现状进行分析,结合作者的研究成果及经验,探讨中药标准品发展方向及趋势.中药标准品的研究还需要经过长期深入的研究,需要加大投资力度,各研究机构应密切配合,整合资源,这样才能推进中药标准品的发展,为生物活性测定法用于中药质量控制奠定坚实的基础.
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四参数log-logistic模型在生物活性测定研究中的应用
目的:利用数学模型拟合生物反应与药物浓度的S曲线关系,比较不同模型的拟合效果.方法:分别利用logistic模型与四参数log-logistic模型对目前常见体外生物活性测定中反应液吸光度与药物浓度的S曲线关系进行拟合.结果与结论:四参数log-logistic模型拟合效果要优于传统的logistic模型,R2分别为1.000和0.9975,误差均方根分别为0.00968和0.1030.在拟合S型曲线方面,四参数log-logistic模型比logistic模型拟合效果更优,且其4个参数更具现实意义,即D和A分别代表S曲线的下限和上限,C代表半数反应浓度,B代表吸光度增长速率参数,相当于S曲线的斜率.
