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一种快速核酸提取试剂在流感病毒检测中的应用评价
目的 探讨一种快速核酸提取试剂在流感病毒检测中的适用性及有效性.方法 选取流感病毒H3亚型、乙型Yamagata系细胞株和甲型H1N1型鸡胚株各1株,对其倍比稀释液及2015年北京市流感病原学监测阳性的67份咽拭子样本,同时采用快速提取法及离心柱提取法提取病毒核酸,经实时荧光PCR法进行定性、定量检测,检测结果采用SPSS19.0软件进行统计分析.结果 快速提取法提取细胞培养液、鸡胚培养液中流感病毒核酸的低检测限高于离心柱法10倍,咽拭子样本则高100倍;快速提取法提取核酸后检测到的病毒载量均低于离心柱法,其中对含有病毒量较高的毒株检测到的病毒载量低于离心柱法10倍,而对病毒量较少的咽拭子样本,则低100倍;快速提取法稳定性优于离心柱法;提取后的核酸-80℃保存10 d后冻融复测,快速提取法核酸损失量大于离心柱法.67份离心柱提取法检测阳性咽拭子样本使用快速提取法提取核酸后检测,两种方法阳性符合率总计为92.54％,其中10～ 102拷贝/ml组,阳性符合率为76.92％,102～ 103拷贝/ml组,阳性符合率为92.59％,＞103拷贝/ml组,阳性符合率为100％.结论 快速提取法具有稳定性高、易于操作、不易污染的优势,适用于细胞培养液、鸡胚培养液等病毒含量较高的大量样本中流感病毒核酸提取,适于检测样本量大、人手不足、设备欠缺的基层实验室使用;但-80℃冻融后核酸损失量较大,不宜反复冻融后使用;传统的离心柱法对于病毒含量较少的咽拭子样本及核酸需被反复冻融使用时具有优势.
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浅析荧光实时定量PCR法检测流感病毒核酸的质控结果
目的:为进一步提高本单位在使用荧光实时定量PCR法检测流感病毒核酸方面的检验水平.方法:对本单位的荧光实时定量PCR法检测流感病毒核酸的质控考核结果进行分析.结果:在本次质控考核实验中,检出流感病毒甲1型和流感病毒甲3型,根据分子生物考核操作标准,本单位使用荧光实时定量PCR法检测流感病毒核酸方面的检验情况合格.结论:荧光实时定量PCR法在检测流感病毒核酸方面具有广泛的应用空间,可以为一些突发性公共性事件的检验提供准确的数据,值得进一步推广.
关键词： 荧光实时定量PCR法 流感病毒核酸 质控 -
2015年南通市流感样病例监测结果
目的 了解2015年南通市流行性感冒(流感)的流行规律,为预防和控制流感的流行提供科学依据.方法 运用荧光定量PCR法检测流感样病例咽拭子流感病毒核酸,并对检测结果进行统计分析.结果 3 168份流感样病例咽拭子样本中,流感病毒核酸阳性标本282份,阳性率为8.90％;核酸分型以季节性甲型流感H3为主,占95.74％.全年均有病例发生,8月和1月为发病高峰.0～＜4岁和≥60岁年龄组发病率较高,阳性率分别为11.59％和13.79％.结论 南通市流感流行的季节性特征明显,夏季和冬季发病率较高;儿童、老年易感;应采取针对性的措施控制流感的流行.
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2012-2013年阿拉善盟流感病原学检测结果分析
目的 分析2012-2013年内蒙古阿拉善盟地区流感病毒核酸检测结果,为防控工作提供科学依据.方法 对国家级流感监测哨点医院(阿拉善盟中心医院)及三旗两区疾控中心送检的流感样病例(ILI)标本采用Real-Time RT-PCR方法进行流感病毒核酸检测.结果 2012-2013年内蒙古阿拉善盟地区共检测流感样病例(ILI)咽拭子407份,流感病毒核酸阳性63份,阳性率为15.48％.其中:季节性H3 25份,检出率为6.14％;甲型H1N1 24份,检出率为5.90％;B型流感14份,检出率为3.44％.结论 2012-2013年阿拉善盟地区主要流行季节性H3和甲型H1N1流感,伴有乙型流感散发.该地区流感流行呈冬春季高发的特点.流感的发病人群以0～19岁年龄段为主,是流感防控的重点人群.
关键词： 流行性感冒 流感病毒核酸 检测 Real-time RT-PCR -
海盐县2011年流感样病例监测
目的:了解海盐县流感病毒优势株的亚型变化和流感的流行趋势,为制定流感的防控策略提供科学依据.方法:采用real time RT-PCR法进行核酸检测和型别鉴定.结果:共采集流感样病例咽拭子和漱口液168份,检出流感病毒核酸阳性14份,其中,新甲型H1N1流感5份,B型流感9份.2011年1月-2011年3月是海盐县流感流行的高峰期,新甲型H1N1、B型流感病毒交替出现.结论:2011年流感阳性率8.33％.1月-3月新甲型H1N1流感和B型流感病毒为主要毒株,9月份后以乙型流感为优势毒株.新甲型H1N1流感流行速度快,活动力强,25～岁年龄组人群是此流行期的高危人群.
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1342例流感样病例病毒核酸监测结果分析
目的:了解曲靖市流感病毒优势株的亚型变化和流感的流行趋势,为制定流感的防控策略和措施提供科学依据.方法:提取咽拭子标本中的病毒核酸,采用real time RT-PCR法进行核酸检测和型别鉴定.结果:2009年10月-2010年9月共采集流感样病例咽拭子1342份,检出流感病毒核酸阳性898份,阳性率66.92%.其中,甲(A)H1N1亚型564份,占62.81%;,甲(A)季3亚型19份,占2.12%;甲(A)季1亚型1份,占0.11%;B型159份,占17.71%;甲型未分型155份,占17.26%.男性阳性率为65.20%,女性阳性率为69.10%.结论:2009年10月-2010年2月,曲靖市流感疫情处于流感流行的高峰期,甲(A)H1N1流感病毒为流感流行主要毒株,2010年5月-2010年7月B型流感上升为主要流行毒株,甲(A)H1N1亚型、甲(A)季3亚型、B型流感病毒在整个监测期间交替出现,甲(A)H1N1亚型作为新出现的流感病毒型别,流行速度快,活动力强.15～岁年龄组人群是此流行期的高危人群,加强学校的流感监测与报告,落实相应的防控措施,将有助于流感的控制.
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北京市通州区2009年流感病原学监测结果分析
目的:分析通州区2009年流感病原学监测结果,了解流感病毒优势株的亚型变化和流感的流行趋势.方法:采集流感样病例咽拭子样品,用RT-PCR法进行核酸检测和型别鉴定,同时做病毒分离和血凝实验(HA).结果:2009年1月份,核酸阳性检出率是57.34%(82/143),分离出病毒37株,其中36株为季节性甲1(H1N1)亚型,1株为甲3(H3N2)亚型;6、7月份抽样做分型鉴定均为甲3亚型;8月份出现新甲型HlNl毒株,8月份-12月份,其核酸阳性占甲型阳性的百分比分别是2.74%、27.08%、57.41%、94.29%和94.12%.结论:2009年通州区流感病毒流行的优势株年初为季节性甲1亚型,6月份-7月份为甲3亚型;8月份开始新甲型H1N1逐步取代其他亚型,10月份以后成为优势株;同时,流感流行的高峰月从与北京以往相似的12月份-1月份提前到10月份-11月份.
关键词： 流感病毒 2009年H1N1流感病毒 流感病毒核酸 -
流感病毒核酸检测能力考核结果分析
目的:参加流感病毒核酸检测能力考核,比对实验结果,找出问题.方法:用RT-PCR方法检测季节性流感A型、H1亚型、H3亚型、B型病毒核酸,用real-time PCR方法检测甲型H1N1病毒核酸.根据反馈结果,RT-PCR方法检测阴性的样品用real-time PCR方法莺新榆测.结果:根据国家流感中心反馈结果,10份盲样中9份分别准确检测到了相应的病毒核酸;1号盲样RT-PCR方法检测阴性,用real-time PCR方法复检为B型流感病毒核酸阳性,表明real-time PCR方法具有更高的灵敏度.结论:real-time PCR方法具有灵敏性高、特异性高、重复性好等优点,适用于流感疫情的快速检测诊断.
关键词： 流感病毒核酸 检测能力 考核 Real-time PCR -
2013-2016年南阳市流感病原学监测结果分析
目的 分析南阳市2013-2016年流感病毒病原学监测结果,为科学有效地防控流感提供依据.方法 采集南阳市第一人民医院流感样病例咽拭子标本,采用实时荧光定量PCR方法检测流感病毒核酸,并对流感病原学监测数据进行分析.结果 2013-2016年,共采集流感样病例标本2 592份,流感病毒核酸阳性362份,总阳性率为13.97％,各年度阳性率差异有统计学意义(x2=75.34,P=0.00＜0.05);4年中,H3N2亚型流行活跃,在2014年和2015年成为优势流行株,2013年和2016年与B型、新甲型H1N1交替流行;新甲型H1N1呈低流行态势;流感病毒在各监测年份中均有一个冬季流行高峰,有2个年度出现夏季流行小高峰,以H3N2亚型流行为主;流感病毒核酸在2013年和2016年以5岁～年龄组(13.67％和35.07％)阳性率高,2014年和2015年以15岁～和25岁～年龄组阳性率高.结论 南阳市在2013-2016年流感整体流行趋势平稳;4个年份均以冬春季流行为主,夏季偶尔出现流行小高峰,H3N2亚型在4年中流行活跃.应继续做好冬春季流感防控工作,进一步关注H3N2亚型的流行趋势和病原学变化,以研究是否有变异情况发生.
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荧光实时定量PCR法检测流感病毒核酸的质控结果探讨
目的：为进一步提高本单位在使用荧光实时定量PCR法检测流感病毒核酸方面的检验水平。方法：对本单位的荧光实时定量PCR法检测流感病毒核酸的质控考核结果进行分析。结果：在本次质控考核实验中，检出流感病毒甲1型和流感病毒甲3型，根据分子生物考核操作标准，本单位使用荧光实时定量PCR法检测流感病毒核酸方面的检验情况合格。结论：荧光实时定量PCR法在检测流感病毒核酸方面具有广泛的应用空间，可以为一些突发性公共性事件的检验提供准确的数据，值得进一步推广。
关键词： 荧光实时定量PCR法 流感病毒核酸 质控
