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一起羊种布鲁氏菌病暴发的流行病学和分子特征研究
目的 调查研究一起羊养殖场中发生的人畜共患羊种布鲁氏菌病(布病)暴发疫情的流行病学和分子特征.方法 血清学实验采用试管凝集试验检测布病抗体,采用纸片法检测菌株的药物敏感性,采用多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)和多位点序列分析(MLST)分析菌株的分子特征.结果 工作人员布鲁氏菌抗体阳性率为7/18,饲养羊的阳性率为5/8.2名工作人员血液分离培养出羊种布鲁氏菌(菌株编号:CQ-18和CQ-11),3只羊的血液分离培养出羊种布鲁氏菌(菌株编号:CQ-154、CQ-159和CQ-237).药敏实验结果:5株菌对环丙沙星、左氧氟沙星、强力霉素、头孢曲松、诺氟沙星、米诺霉素、莫西沙星、氧氟沙星、利福平和链霉素敏感,CQ-154和CQ-237菌株对复方新诺明敏感,CQ-159、CQ-18和CQ-11菌株对复方新诺明耐药,5株菌均对阿奇霉素和克拉霉素耐药.MLVA分析发现,CQ-154菌株在BRU16位点少了一个串联重复序列,菌株CQ-18在BRU04位点增加了一个串联重复序列,MLST分析5株菌株ST型为8型.结论 布鲁氏菌长期在动物体内存在,是人畜感染布病无法根治的一个关键问题.在我国首次发现对复方新诺明耐药的羊种布鲁氏菌菌株.
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实时定量PCR检测大肠埃希菌在LB培养基和血中对抗生素的药物敏感性
目的 建立以实时定量PCR快速检测大肠埃希菌在LB液体培养基和健康人全血中对抗生素药物敏感性的方法.方法 临床血培养获得大肠埃希菌株,以常规纸片法检测其对抗生素的药物敏感性.分别在LB液体培养基和健康人新鲜全血中加入该大肠埃希菌至终浓度为0.5麦氏单位,采用不加抗生素的标本作为生长对照组,加入耐受或敏感的抗生素的标本作为耐受药物组或敏感药物组,37℃震荡培养,分别提取0、1、2、3、4小时的基因组DNA,以大肠埃希菌特异β-右旋半乳糖苷酶基因的引物和TaqMan探针,对标本进行实时定量PCR检测.结果 实时定量PCR方法有较好的重复性(CT值变异系数0.26%～1.56%)和精确度(大肠埃希菌DNA提取效率在LB培养基中为43.6%,在血中为26.7%),标准曲线线性关系好(R2≥0.998).培养1～3小时后,耐受药物组与生长对照组的大肠埃希菌DNA拷贝数均呈对数增长,在LB液体培养基中增至约19～120倍,在新鲜全血中增至约6～11倍;敏感药物组大肠埃希菌DNA拷贝数呈减少趋势,在LB液体培养基中减至0.22～0.12倍,在新鲜全血中为1.29～0.14倍.上述药敏结果与常规纸片法一致.结论 采用实时定量PCR检测大肠埃希菌在LB液体培养基和健康人全血中对抗生素的药物敏感性,结果与常规纸片法一致,但更快速.
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儿童金黄色葡萄球菌感染及其耐药性分析
目的 了解该院儿童金黄色葡萄球菌感染及耐药情况.方法 收集2012年1月～ 2014年12月该院儿童标本中分离出来的金黄色葡萄球菌共472例,采用MIC法进行抗生素药敏试验.X2检验分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)与甲氧西林敏感性金黄色葡萄球菌(MSSA)的耐药率差异.结果 金黄色葡萄球菌常侵犯4个月以下的婴幼儿,此年龄段金黄色葡萄球菌的阳性分离比率达68.86％ (325/472).分离的MRSA占金黄色葡萄球菌总数的19.49％ (92/472),且对青霉素、红霉素、克林霉素的耐药性远强于MSSA,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 加强金黄色葡萄球菌抗生素敏感性的监测,可追踪金黄色葡萄球菌新的耐药趋势,从而便于对医院及社区获得性金黄色葡萄球菌感染进行控制及管理.
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健康儿童鼻携带MRSA SCCmec分型及耐药性分析
目的:了解健康儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)染色体mec基因盒(SCCmec)基因分型及其对抗生素的耐药性.方法:自2011年3-5月收集广州荔湾区463名幼儿园儿童及1 012名小学生鼻拭子进行金黄色葡萄球菌分离鉴定,用头孢西丁药敏纸片鉴定MRSA,并对阳性菌株进行药敏检测;采用多重聚合酶链反应(M-PCR)对MRSA进行SCCmec基因分型.结果:1 475名儿童中共检出28株MRSA,SCCmecⅢ型1株(3.6％)、SCCmecⅣa型24株(85.7％)、SCCmec Ⅴ型3株(10.7％).39.3％的MRSA菌株(11株)呈多药耐药状态,常见的耐药模式是青霉素-红霉素-克林霉素-四环素.28株MRSA对利福平、复方磺胺甲噁)唑、利奈唑胺及万古霉素均敏感.结论:在健康儿童鼻前庭中既携带有社区相关MRSA (CA-MRSA)菌株,亦携带医院相关MRSA (HA-MRSA).MRSA呈多药耐药状态,青霉素、红霉素、克林霉素、四环素不宜作为经验用药之首选.
