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撤消轮状病毒疫苗的推荐
1999年7月,CDC推荐卫生保健人员和父母亲对婴儿至少在1999年11月以前推迟使用弥猴轮状病毒4价疫苗(RRV-TV)(RotashieldR,Wyeth实验室Inc Marietta,宾夕法尼亚).该行动是根据接到轮状病毒疫苗在15名婴儿中导致肠套叠的疫苗有害事件报告做出的.同时,制造商还与食品与药品管理局(FDA)商量自觉停止疫苗销售.
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弥猴单侧软腭肌肉对针式电极刺激的反应
目的 建立针电极口内刺激猴软腭肌肉诱发腭咽闭合运动的模式,取得软腭肌肉运动的有效刺激数值,为软腭肌肉功能重建奠定基础.方法通过解剖成年猕猴软腭的五组肌肉,确定其体表位置;利用实验动物用腭部肌肉电极定位刺激器及针式电极对软腭肌肉进行有效刺激;结合鼻咽纤维镜、头颅侧位X片及软腭造影技术观察、记录肌肉收缩及腭咽闭合动作.结果 在猕猴口内定位目标肌肉进行针电极刺激可诱发肌肉收缩.刺激电压为3 V、刺激频率为20 Hz时均能诱发单侧软腭肌肉的有效收缩;单侧腭帆提肌在刺激电压为5 V、20 Hz时可发生腭咽闭合动作.咽腭肌、舌腭肌在刺激电压5 V、刺激频率100 Hz时发生软腭下降动作.腭帆张肌仅发生收缩,而未发生腭咽闭合.应用鼻咽纤维镜和X线成像技术配合能记录腭咽闭合动作. 结论 弥猴可作为研究软腭肌肉运动模式的实验动物.应用电极刺激软腭肌肉,可初步建立腭咽闭合的动作模式.
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SV40T抗原荧光真核表达载体构建及在胰岛细胞中的表达
背景:有研究表明小鼠胰岛细胞永生化以后增殖能力明显增强,但功能减弱.然而,小鼠的端粒和人类的端粒有差别,大鼠的端粒与人类的相似.目的:设计和构建SV40T荧光真核表达载体,导入大鼠胰岛细胞中进行表达鉴定.设计、时间及地点:细胞观察实验,于2007-10/2008-04在深圳市人民医院中心实验室完成.材料:选用成年雄性SD大鼠2只;pCMV-SV40T质粒:pSC-A质粒;plRES2-ZsGreenl质粒.方法:用Not I和Xho I将SV40T片断从pcMV-SV40T质粒上双酶切下来,同收后克隆到载体pSC-A中成为pSC-SV40T,再用Xho I和Sac II将SV40T片断双酶切下来,回收后正向克隆到荧光真核表达载体plRES2-ZsGreen I中,酶切鉴定重组质粒;用脂质体转染的力法将构建的载体导入原代培养的人鼠胰岛细胞:检测SV40T基因在胰岛细胞中的表达.主要观察指标:绿色荧光蛋白的表达:SV40的转录和翻译.结果:[1]经Xho I和Sac II双酶切后,重组质粒被切成5.3 kb和2.4 kb 2个片段,与理论预期长度相符.[2]pIRES2-ZsGreenl-SV40T重组基因经脂质体法转染,G418筛选,在胰岛细胞内町见绿色荧光,反转录-聚合酶链反应及细胞免疫荧光染色可见SV40T mRNA转录及其蛋白的表达.结论:实验成功构建了SV40T荧光真核表达载体,并可在大鼠胰岛细胞中表达.
