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环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白功能及肠平滑肌收缩性的影响
目的:探讨环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白功能及肠平滑肌收缩性的影响.方法:在纯化的蛋白体系中进行平滑肌肌球蛋白Ca2+依赖性磷酸化反应,采用甘油聚丙烯酰胺凝胶电泳测定肌球蛋白轻链磷酸化程度,孔雀绿法测定肌球蛋白Mg2+-ATPase活性.以平滑肌肌球蛋白Mg2+-ATPase活性、肌球蛋白磷酸化以及在克氏液中孵育的肠平滑肌收缩振幅为指标,考察环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白Mg2+-ATPase活性和肌球蛋白磷酸化程度的调节作用,以及环氧橙皮油素对大鼠离体小肠平滑肌收缩性的影响.结果:在肌球蛋白轻链的Ca2+依赖性磷酸化反应中,在40～320 μmol·L-1浓度内环氧橙皮油素能抑制磷酸化肌球蛋白Mg2+-ATPase活性及其轻链磷酸化程度(P＜0.01),这种抑制作用与1-(5-氯-1-萘-磺酰)-六氢-1,4-二氮杂卓(ML-9)具有协同作用；40 - 320μmol·L-1浓度内环氧橙皮油素可剂量依赖性抑制大鼠离体小肠平滑肌收缩,且可拮抗新斯的明、乙酰胆碱引起的促进收缩作用,相加阿托品引起的抑制收缩作用(P＜0.01).结论:环氧橙皮油素可通过抑制平滑肌肌球蛋白的功能,抑制胃肠平滑肌的收缩性.
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枳实中活性单体环氧橙皮油素抗溃疡性结肠炎的作用
目的:观察环氧橙皮油素对溃疡性结肠炎小鼠治疗作用.方法:BALB/C小鼠分为6组,分别为环氧橙皮油素低、中、高剂量组(80,160,320 μmol·L-),正常组,柳氮磺砒啶肠溶片组(520 mg· kg-)和葡聚糖硫酸钠(DSS)模型组.除模型组外均按0.01 mL·g-1体重剂量ig给药,正常组给予等体积的生理盐水.除正常组外各给药组在给药同时自由饮用4％DSS水溶液,连续造模10 d.观察各组药物对BALB/C小鼠疾病活动指数的影响;采用结肠损伤评分法,观察各组药物对病变肠组织的影响;ELISA法测结肠组织细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-10(IL-10)含量;Western blot法测定环氧橙皮油素对受损结肠平滑肌肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达水平影响.结果:与模型组比较,环氧橙皮油素中、高剂量组疾病活动指数明显降低(P＜0.05),结肠损伤指数明显降低(P＜0.05),环氧橙皮油素各剂量组结肠组织TNF-α含量逐渐降低,其中高剂量组与模型组有显著差异(P＜0.05),环氧橙皮油素各剂量组结肠组织IL-10含量逐渐升高,其中中、高剂量组与模型组均有显著差异(P＜0.05),环氧橙皮油素各剂量组均能使受损结肠平滑肌细胞肌球蛋白轻链激酶表达量降低,中、高剂量组与模型组有显著性差异(P＜0.05).结论:环氧橙皮油素通过不同作用机制对溃疡性结肠炎起到治疗作用.
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环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白功能及肌球蛋白轻链激酶表达量的影响
目的 研究环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白功能及肌球蛋白轻链激酶表达量的影响.方法 考察在钙离子存在的条件下,环氧橙皮油素对20 kDa肌球蛋白轻链的钙离子依赖性磷酸化反应的影响；用孔雀绿法测定环氧橙皮油素对肌球蛋白Mg2+ -ATPase活性的影响；采用蛋白免疫印迹方法考察环氧橙皮油素对平滑肌细胞中肌球蛋白轻链激酶的表达量影响.结果 环氧橙皮油素在20 ～ 320μmol/L范围内剂量依赖性抑制肌球蛋白轻链磷酸化,在5～20 min范围内时间依赖性抑制肌球蛋白轻链磷酸化；在5 ～ 20 min时间范围内,随着环氧橙皮油素用药浓度增加,呈现剂量依赖性抑制肌球蛋白Mg2+ -ATPase活性；在40～ 320 μmol/L范围内剂量依赖性抑制肌球蛋白轻链激酶表达,在0～96 h范围内时间依赖性抑制肌球蛋白轻链激酶表达.结论 环氧橙皮油素可通过抑制平滑肌肌球蛋白功能及肌球蛋白轻链激酶表达量,抑制胃肠道平滑肌的收缩.
