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麦粒灸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤不同时期保护效应及Beclin1表达的影响
目的:观察麦粒灸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)不同时期保护效应差异,探讨该影响与自噬相关蛋白Beclin 1表达的相关性.方法:SD大鼠随机分为模型组、麦粒灸1d组、麦粒灸2d组、麦粒灸3d组、麦粒灸4d组、麦粒灸5d组、麦粒灸7d组,每组6只.选择大鼠双侧“内关”穴进行麦粒灸预处理后,结扎心脏冠状动脉左前降支制备心肌缺血再灌注模型,进行心电图监测并于再灌注4h后取心脏,采用TTC染色评价不同时间预处理的效应差异.在明确麦粒灸预处理佳干预时间后,增设假手术组、模型组、麦粒灸组、自噬抑制剂组,每组各12只,分别于缺血30 min和再灌注240 min各6只,ELISA法检测血清中肌钙蛋白(cTnT)含量,HE染色观察心肌病理学变化,Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2同源的水溶性相关蛋白(Bax)、Beclin 1的表达水平.结果:与模型组比较,麦粒灸4、5、7d组大鼠心肌梗死面积百分比明显减少(P＜0.05).与假手术组相比,模型组心肌纤维断裂、排列紊乱,且有炎性细胞浸润,缺血期与再灌注期cTnT、Bax/Bcl-2、Beclin 1均升高(P＜0.01).与模型组相比,麦粒灸组与自噬抑制剂组心肌纤维断裂、排列紊乱程度较轻,间质水肿,少量炎性细胞浸润,缺血期与再灌注期cTnT、Bax/Bcl-2、Beclin 1含量均显著下降(P＜0.01).与自噬抑制剂组比较,麦粒灸组缺血期与再灌注期cTnT、Bax/Bcl-2、Beclin 1均升高(P＜0.05).各组再灌注期与缺血期相比,cTnT、Bax/Bcl-2、Beclin 1差异无统计学意义(P＞0.05).结论:麦粒灸“内关”穴能有效降低心肌梗死面积,该保护效应与自噬相关,其作用机制可能为促进缺血期自噬发生,抑制再灌注期自噬过表达,从而减轻MIRI.
关键词： 心肌缺血再灌注 麦粒灸 自噬 自噬相关蛋白Beclin 1 -
自噬相关蛋白在肾透明细胞癌与癌旁组织中表达状况的比较研究
目的 检测自噬表达水平在正常组织和肾透明细胞癌组织中的差异. 方法 2011年1-4月采用免疫组化方法检测69例肾透明细胞癌患者的正常组织和肿瘤组织中自噬相关蛋白(p-mTOR、P62、LC3、Beclin 1、ULK1、ATG5、ATG7)表达的差异,并对其表达差异及各蛋白间表达量变化的相关性进行统计学分析.2011年8月采用透射电镜对4例肾癌患者的正常组织和肿瘤组织进行细胞超微结构的分析. 结果 与正常组织相比,p-mTOR(P=0.004)、P62(P=0.000)和ULK1(P=0.000)在肿瘤组织中的表达上调,而Beclin 1(P=0.000)、LC3(P=0.000)和ATG7(P=0.000)的表达下调,差异均有统计学意义.ATG5表达量无明显变化(P=0.349).形态分析结果显示肿瘤细胞内的自噬体数量少于正常组织.p-mTOR与P62(P=0.026)、LC3(P=0.027)和ATG7(P=0.049)的表达水平变化之间具有相关性,而与Beclin 1不相关. 结论 自噬的表达水平在肾透明细胞癌中下调,其下调受mTOR等多种自噬相关蛋白的协同影响.
