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补肺益肾方对脂多糖刺激细胞分泌细胞因子的影响
目的:从补肺益肾方药对脂多糖(LPS)刺激细胞分泌细胞因子变化的影响,揭示补肺益肾方药治疗COPD分子机理.方法:LPS刺激肺泡上皮细胞A549、气道上皮细胞H292、单核巨噬细胞THP-1,每种细胞均分为正常组(20％正常大鼠血清)、LPS组(20％正常大鼠血清和75 pg·mL-1LPS)、用药组(20％补肺益肾方药大鼠血清和75 pg· mL-1LPS),ELISA法检测细胞因子,应用网络工具分析细胞因子的转录因子.结果:与正常组比较,LPS组THP-1细胞分泌MMP-9、TGF-β增多,分泌TNF-α、PPAP2B减少；A549细胞分泌TIMP增多,分泌IL-3、TGF-β减少；H292细胞分泌IL-8增多.与LPS组比较,用药组THP-1细胞分泌TNF-α、TGF-β、TIMP-1、MMP-9 (P＜0.01)及GM-CSF、SOD、CD36 (P＜0.05)增加,TGF-β分泌减少(P＜0.01)；H292细胞分泌IL-8减少(P＜0.01),TNF-α、TIMP-1、PPAP2B (P＜0.05)和TGF-β(P＜0.05)分泌增加；A549细胞分泌TIMP-1、TNF-α(P＜0.01)和PPAP2B(P＜0.05)减少,MMP-9、IL1B增加(P＜0.01).与LPS组比较,用药组有改变细胞因子的转录因子:THP-1细胞的AP1、NFKB1、STAT3、SMAD3和PPARG,A549细胞的STAT3和PPARG满足激活条件.结论:LPS对单核巨噬细胞THP-1分泌细胞因子影响大,补肺益肾含药血清对LPS引起的细胞因子分泌变化有一定调节作用.
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补肺益肾方及其拆方含药血清对烟雾和脂多糖刺激细胞分泌细胞因子的影响
目的:研究补肺益肾方药治疗COPD分子机理和组方规律.方法:肺泡上皮细胞A549、气道上皮细胞H292、单核巨噬细胞THP-1等细胞均分为正常对照组(20％空白大鼠血清)、模型组(20％空白大鼠血清,75 pg/mL及5％ CSE刺激)及全方、拆方组[益气组(1)、益肺肾组(2)、活血组(3)、化痰组(4)、益气+益肺肾组(5)、益气+活血组(6)、益气+化痰组(7)、益气+益肺肾+活血组(8)、益气+益肺肾+化痰组(9)、益气+活血+化痰组(10)、全方组(11)]；20％大鼠含药血清.ELISA法检测细胞因子,应用网络工具分析细胞因子的转录因子.结果:与正常对照组比较,模型组THP-1细胞分泌MMP-9和GM-CSF、TGF-β增多,分泌TNF-α、PPAP2B、IL-3、SOD减少.A549细胞分泌TIMP-1增多,分泌MMP-9和TNF-α、TGF-β、IL-3减少.H292细胞分泌TNF-α、MMP-9和GM-CSF、CD36、TIMP-1增多,IL-8分泌减少.与模型组比较,THP-1细胞3、6、10、11方组THP-1分泌GM-CSF减少;10和11方组分泌TGF-β减少；9和5方组分泌MMP-9减少,1、2、3、4、7、8、10、11方组分泌增加；1、2、3、4、6、8、9方组分泌TNF-α增加,11方组分泌TNF-α减少；除2方组外,其他各用药组分泌IL-3显著增加；2、4、5、8、9、11方组分泌SOD增加；1、2、3、4、5、6、7方组分泌PPAP2B增加,11方分泌减少.A549细胞1、2、3、4、5方组分泌TIMP-1增加,11方组分泌TIMP-1减少；除1、4方组外其他用药分泌MMP-9升高；除11方减少外,其他药物组分泌TGF-β升高；除8方组外,其他用药组分泌TNF-α增加；1、2、4、5、11和3方组分泌IL-3增加.H292细胞5、6、7和2方组H292细胞分泌GM-CSF减少；1、2、4、6、7、8、9、10方组分泌TNF-α减少；4、8、7、9方组分泌MMP-9减少；所有用药组分泌TIMP-1无明显改变.结论:补肺益肾方及其拆方对CSE和LPS诱导的细胞因子分泌都有一定的调节作用,因不同靶细胞和靶因子有所不同.其中活血方侧重于调节炎症因子,益肺肾方侧重于脂质代谢和氧化调节,全方调节蛋白酶相关因子分泌作用为广泛,化痰、活血、益肺肾方次之.
