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不同补肾方对卵巢摘除术后骨质疏松大鼠Wnt信号表达的影响
目的:比较3种补肾方对卵巢摘除骨质疏松大鼠Wnt通路β-Catenin mRNA表达的影响.方法:雌性SD大鼠70只,随机分为假手术组、模型组、龟鹿二仙胶组、二仙汤组、补肾活血组、雌二醇组、仙灵骨葆组,每组10只.双侧卵巢摘除术复制骨质疏松模型,术后30天进行相应的给药实验,假手术组和模型组给予灌服等量的生理盐水.12周后测定各组大鼠血清中Ⅰ型胶原羧基端肽(β-Crosslaps)、Ⅰ型前胶原氨基端延长肽(P1NP)含量;以双能X线骨密度测定仪测定大鼠股骨的骨密度;用RT-PCR检测右侧股骨髓LRP5、Wnt2、β-Catenin mRNA表达,用Western blot方法检测LRP5、Wnt2、β-Catenin蛋白表达.结果:与sham组比较,模型组股骨骨密度、血液PINP浓度、β-Catenin mRNA、LRP5 mRNA、Wnt2 mRNA表达均显著降低(P＜0.01),β-Crosslaps浓度显著增高(P＜0.01).与模型组比较,3组中药组骨密度、血液PINP浓度、LRP5 mRNA、β-Catenin mRNA、Wnt2 mRNA及蛋白表达显著增高(P＜0.05),血液β-Crosslaps浓度显著降低(P＜0.01),补肾活血组骨密度及β-Catenin mRNA及蛋白表达高于其他两补肾方剂组.结论:补肾方通过Wnt信号通路促进去卵巢大鼠成骨细胞增殖而改善骨质疏松症,补肾活血组方效果更为明显.
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补肾活血中药对骨质疏松大鼠Wnt信号的影响
目的：探讨补肾活血方对卵巢摘除骨质疏松大鼠Wnt通路β－Catenin mRNA表达的影响。方法 SPF级250±20 g雌性SD大鼠40只，随机分为假手术组（sham group）、模型组（model group）、雌激素药物治疗组（E group）、中药组（TCM group），每组10只。对假手术组大鼠施行假手术，其余4组行双侧卵巢摘除术，术后30天进行相应的给药实验，假手术组和模型组给予灌服等量的生理盐水。12周后测定各组大鼠血清中I型胶原羧基端肽（β－Crosslaps）、I型前胶原氨基端延长肽（ P1NP）含量；以双能X线骨密度测定仪测定大鼠的骨密度；用RT－PCR检测右侧股骨髓LRP5、Wnt2、β－Catenin mRNA表达。结果model组动物骨密度值（0．137±0．013 g／cm2）、P1NP浓度（4．388±0．400 ng／ml）、β－Catenin mRNA表达（1．05±0．18）、LRP5 mRNA表达（0．96±0．24）、Wnt2 mRNA表达（0．53±0．11）。与模型组比较，sham组及TCM组BMD（0．168±0．008，0．173±0．008）显著增高（P＜0．05），血清β－Crosslaps（0．575±0．068，0．618±0．119）、LRP5 mRNA表达（1．63±0．51，2．630．22）显著增高（P＜0．05），sham、E、TCM组Wnt2mRNA表达（1．03±0．02，1．23±0．12，1．58±0．20）及β－Catenin mRNA表达（1．95±0．16，1．62±0．17，2．12±0．20）显著增高（P＜0．05）；与sham组比较，TCM组β－Crosslaps、BMD（0．618±0．119，0．173±0．008）没有差异（P＞0．05），P1NP、Wnt2、LRP5 mRNA表达（6．310±0．990，1．58±0．20，2．63±0．22）显著增高（P＜0．05）；与E组比较，TCM组PINP、BMD、Wnt2、β－catenin、LRP5显著增高（ P＜0．05）。结论补肾活血中药通过调节Wnt信号促进去卵巢术后骨质疏松大鼠成骨细胞增殖。
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补肾中药对去卵巢骨质疏松大鼠股骨mGluR5表达的影响
目的 探讨补肾中药对双侧卵巢摘除引起的骨质疏松大鼠mGluR5表达的影响.方法 取3月龄SPF级雌性SD大鼠40只,随机分为假手术组(Sham group)、模型组(Model group)、中药组(TCM group)、雌激素药物治疗组(E group),每组10只.对sham组大鼠施行假手术,其余4组行双侧卵巢摘除术.术后30d进行相应的给药实验,TCM组按10g/kg生药剂量灌胃,E组按0.2mg/kg剂量灌胃,Sham及Model组灌服等量的生理盐水.12周后测定各组大鼠血清中Ⅰ型胶原羧基端肽(β-Crosslaps)、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(P1NP)、Ca和P的含量;以双能X线骨密度测定仪测定大鼠的骨密度;Western blot方法检测股骨骨骺mGluR5蛋白表达.结果 Model组BMD为(0.137 ±0.013) g/cm2,血清Ca/P比值为(1.65±0.37)、P1NP浓度(4.388±0.400) ng/mL、Glu表达(0.424±0.061)与假手术组比较显著降低(P＜0.05),β-Crosslaps浓度(0.745±0.075)ng/mL、mGluR5表达(0.855±0.116)较假手术组高(P＜0.01);TCM组BMD为(0.156±0.006) g/cm2,血清Ca/P比值为(2.59±0.55)、P1 NP浓度为(5.749±0.611) ng/mL、Glu表达(0.702±0.080)与模型组比较显著增高(P＜0.01),β-Crosslaps浓度(0.648±0.069) ng/mL、mGluR5表达(0.553±0.070)显著降低(P＜0.01);E组组BMD (0.146±0.006) g/cm2、Glu表达(0.547±0.075)低于TCM组(P＜0.05),而其β-Crosslaps浓度为(0.649±0.052) ng/mL、P1 NP浓度为(5.516 ±0.351) ng/mL、Ca/P比值为(2.70±0.55)则与TCM组没有差异(P＞0.05).结论 补肾中药能有效防止去卵巢模型大鼠骨质疏松的形成,可能通过调节骨内谷氨酸进一步介导骨重建而发挥作用.
关键词： 骨质疏松 双侧卵巢摘除术 补肾 抗代谢性谷氨酸受体5 动物模型
