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2,5-己二酮对坐骨神经及运动神经元瘤细胞VSC4.1神经生长因子水平的影响
目的 研究2,5-己二酮(2,5-hexanedione,2,5-HD)对大鼠坐骨神经和运动神经元神经生长因子(nerve growth factor,NGF)水平的影响.方法 应用随机数字表法将50只Wistar大鼠分为400 mg·kg~(-1)·d~(-1),5-HD染毒0、7、14、21-,28 d组,每组10只,采用免疫组织化学显色和荧光定量PCR检测不同时间坐骨神经横断面NGF水平和坐骨神经NGF mRNA水平.选用0、2.5、5.0、10.0、20.0 mmol/L 2,5-HD染毒神经元瘤细胞VSCA.1,应用免疫荧光法观察NGF水平的改变;并选用10.0 mmol/L2,5-HD作染毒剂量,观察0、1、3、6、12、24、48 h NGF水平的变化.结果 随染毒时间延长,坐骨神经NGF呈先增高后降低的趋势;坐骨神经NGF mRNA水平在染毒14 d(2~(-△△Ct)=3.46)、21 d(2~(-△△Ct)=5.28)和28 d(2~(-△△Ct)=3.10)高于染毒0d(2~(-△△Ct)=1)和7 d(2~(-△△Ct)=0.78),差异有统计学意义.各染毒剂量组VSCA.1细胞NGF水平差异有统计学意义(F=188.88,P<0.01);5.0、10.0、20.0 mmol/L组NGF平均荧光强度值(分别为43.24±7.52、43.48±10.86、63.13±10.68)高于0 mmol/L组(16.32±4.20)(q值分别为19.92、19.72、32.78,P值均<0.01)和2.5 mmol/L组(19.78±2.66)(q值分别为17.50、17.42、30.63,P值均<0.01);20.0 mmol/L组高于5.0、10.0 mmol/L组(q值分别为13.04、11.71,P值均<0.01).10.0 mmol/L 2,5-HD染毒不同时间VSCA.1细胞NGF水平差异有统计学意义(F=75.69,P<0.01);染毒6、12、24、48 h NGF平均荧光强度值(分别为18.66±2.89、23.14±6.08、27.66±6.11、17.25±3.05)高于染毒0 h(10.18±1.81)(q值分别为9.64、15.74、21.76、8.50,P值均<0.01)、染毒1 h(9.31±1.28)(q值分别为10.28、16.17、21.95、9.20,P值均<0.01)和染毒3 h(10.44±2.13)(q值分别为9.25、15.24、21.17、8.10,P值均<0.01);染毒12、24 h NGF平均荧光强度值高于染毒6 h(q值分别为5.24、10.77,P值均<0.01)和染毒48 h(q值分别为7.31、13.26,P值均<0.01).结论一定时间内,2,5-HD可导致大鼠坐骨神经和运动神经元NGF的水平升高,有剂量(时间)依赖关系.
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大蒜油对正己烷在小鼠体内代谢成2,5.己二酮的影响
目的 探讨大蒜油对正己烷(n-hexane)在小鼠体内代谢成2,5.己二酮(2,5.hexanedione,2,5-HD)的影响.方法 取健康成年昆明种小鼠,随机分为正己烷染毒组和大蒜油干预组,分别灌胃给予正己烷和大蒜油,染毒结束后取血,分离血清经乙酸乙酯萃取后气相色谱法测定血清中2,5-HD含量.结果 (1)一次性给予4000 mg/kg正己烷后,小鼠血清中2,5-HD含量随时间延长而增加,10 h后达峰值,20 h后几乎不能检出;(2)对照组小鼠血清中未检出2,5-HD;随着正己烷染毒量的增加,小鼠血清中2,5-HD含量明显增加,2000、4000和6000 mg/kg组染毒8 h后小鼠血清2,5-HD含量分别为8.04、16.68和22.38μg/ml,呈明显的剂量一效应关系;(3)不同周龄小鼠给予正己烷8 h后血清中2,5-HD含量有明显差异,5周龄组(22.83;μg/ml)分别大于4周(19.59μg/ml)和6周龄组(16.42μg/ml),差异有统计学意义(P<0.05);(4)不同性别小鼠给予同剂量正己烷后,雌性小鼠血清中2,5-HD含量(13.22 t,g/na)高于雄鼠(10.34μg/ml),差异有统计学意义P<0.05;(5)正己烷染毒前后2 h分别给予80 mg/kg大蒜油,血清中2,5-HD含量与单纯染毒组相比均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),但染毒前给药组较染毒后给药组更低,但差异无统计学意义(P>0.05);染毒前2 h给予不同剂量大蒜油,10、20、40、80 mg/kg大蒜油+3 000 mg/kS正已烷组小鼠血清2,5-HD含量比染毒组分别降低16.2%、20.8%、22.8%和32.1%,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),呈明显的剂量一效应关系.结论 在雌性小鼠血清中正己烷的代谢产物2,5-HD高于雄性;5周龄小鼠血清2,5-HD含量较4周和6周龄小鼠高;正己烷染毒前后给予大蒜油可明显减少2,5-HD的生成.
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P0与P2蛋白引发的自身体液免疫介导正己烷周围神经病的作用
目的 研究P0与P2蛋白引发的自身体液免疫在介导正己烷周围神经病髓鞘损害中的作用,探究正己烷职业接触工人血清P0抗体、P2抗体的水平与尿中2,5-己二酮含量的剂量-反应关系.方法 选取26名正己烷中毒性周围神经病患者(病例组)、269名正己烷接触1年以上工人(接触组)和104名未接触正己烷工人(对照组),使用酶联免疫吸附法测定血清P0抗体、P2抗体的水平.测定接触组工人尿2,5-己二酮的含量,并依据WS/T 243-2004《职业接触正己烷的生物限值》,分别设为高接触组和低接触组.结果 病例组血清P0抗体(IgG、IgM)、P2抗体(IgG、IgM)阳性率为100％,血清P0抗体、P2抗体水平在病例组、接触组和对照组3组之间差异均有统计学意义(P＜0.01).接触组尿中2,5-己二酮含量均值为(3.10±1.35) mg/L,高接触组血清P0抗体、P2抗体水平与低接触组的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 P0与P2蛋白引发的自身体液免疫介导正己烷周围神经病髓鞘损害的发生和发展,血清P0抗体、P2抗体的表达水平与尿2,5-己二酮含量无明显的剂量-反应关系.
