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消毒效果的快速评价方法研究进展
消毒效果的评价是消毒工作的一个重要环节.传统的评价方法是将消毒处理后的样本转种到培养基中培养后观察有无细菌生长或进行活菌计数,以定性或定量数据评价消毒效果.
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家犬粪便中的细粒棘球绦虫DNA PCR检测方法的建立
目的 建立检测家犬粪便中细粒棘球绦虫DNA的PCR方法,为开展流行病学监测提供检测手段.方法 犬粪经液氮反复冻溶后提取DNA,PCR扩增编码细粒棘球绦虫12s rDNA检测该靶DNA片段(255 bp). 结果10只细粒棘球绦虫感染犬,8只(体内成虫数＞80条)阳性,2只(体内成虫数分别为4条和5条)阴性.4只未感染家犬粪样及其他3种绦虫DNA样本均为阴性.结论 初步建立了灵敏、特异的检测家犬粪便中细粒棘球绦虫的PCR方法.
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肌钙蛋白I与肌红蛋白在不稳定心绞痛中的变化和预后判断
UA是介于稳定型心绞痛和AMI之间的一组临床心绞痛综合征,由于不稳定性斑块破裂伴有血栓形成和血管收缩,使心肌供血不足,造成缺血性微小损伤.从而随时有引发心脏病发作的可能.
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一种稳定、灵敏且适用于ELISA的四甲基联苯胺底物
目的 评价一种适用于酶联免疫吸附试验(ELISA)的即用型自制四甲基联苯胺(TMB)底物的特性.方法 比较1-Step Turbo TMB底物、A/B两组分混合物底物和自制底物与不同稀释度酶标抗体的反应性及其对包被抗体的检测敏感性,对1-Step Turbo TMB底物和自制底物进行稳定性比较.结果 3种底物的吸光度(A)值均随着酶标抗体稀释度的增大而显著下降;当酶标抗体稀释度相同时,自制底物的A值显著高于另外2种底物(P＜0.05);在直接ELISA条件下,自制底物对包被抗体的检测敏感性可达15.63 ng/mL;自制底物37℃贮存60 d后的A值仍高于1-Step Turbo TMB底物37℃贮存5 d的A值.结论 该即用型自制TMB底物在检测敏感性及稳定性上优于1-Step Turbo TMB底物.
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液相微萃取技术在体内药物分析中的应用
液相微萃技术是一种新型水样预处理方法,结合了液液萃取和固相微萃取技术,依据萃取有机溶剂的状态,提取有效成份,应用于唾液、血浆等生物样品以及土壤、食品和环境水样中不同组分的分析.
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SYBR Green 实时荧光定量聚合酶链反应宽范围检测人GAPDH基因体系的建立
目的：建立一种快速、灵敏的人3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）基因实时荧光定量-聚合酶链反应（RT-PCR）方法。方法根据GeneBank数据库中提供的人GAPDH基因（NC＿000012）mRNA序列，在其保守区域设计一对用于RT-PCR引物，通过优化反应体系和反应条件，成功建立了检测人GAPDH 基因的SYBR Green RT-PCR方法。结果实验结果表明，该检测方法检测人G A PD H基因的低检测拷贝数可达到15 co pies／μL ，在一个较宽的浓度范围内（1．5×101～1．5×107）具有良好的线性关系（r＝0．992）。溶解曲线呈现了清晰的单一峰型，Tm值为（84．5±0．2）℃。结论该研究为人GAPDH基因作为内参基因进行人功能基因与病原基因表达的定量分析提供了一种更为快速、灵敏的方法。
关键词： 内参基因 3-磷酸甘油醛脱氢酶 荧光定量-聚合酶链反应 灵敏
