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miR-146a通过TLR4-ACAT1信号通路抑制巨噬细胞脂质蓄积
目的:观察miR-146a对泡沫细胞内胆固醇水平的影响,探讨TLR4-ACAT1信号通路在miR-146a调控胆固醇酯中的作用.方法:转染miR-146a mimic和Inhibitor,采用HPLC观察总胆固醇、胆固醇酯和游离胆固醇的变化;qPCR和Western-blot法检测TLR4和ACAT1 mRNA和蛋白的变化.结果:TLR4是miR-146a的一个靶基因,miR-146a通过调控TLR4-ACAT1信号通路,抑制细胞内游离胆固醇向胆固醇酯的转化,减少巨噬细胞内的胆固醇酯含量,减少泡沫细胞的形成.结论:miR-146a通过调控TLR4-ACAT1信号通路,抑制胆固醇酯的形成和泡沫细胞的形成,是动脉粥样硬化防治的重要靶点.
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乙酰辅酶A乙酰转移酶1在前列腺癌中的表达及临床意义
目的：探讨乙酰辅酶A乙酰转移酶1( ACAT1)在前列腺癌中的表达情况及临床意义。方法采用免疫组化染色，检测63例前列腺癌组织及癌旁正常组织中ACAT1的表达情况。结果 ACAT1在前列腺癌组织及正常前列腺组织中的表达阳性率分别81.0％和20.6％，差异有统计学意义(P<0.05)，且与前列腺癌患者年龄、前列腺特异性抗原(PSA)水平无关(P>0.05)，但与Gleason score(GS)及肿瘤病理分期有关(P<0.05)。结论ACAT1的表达在前列腺癌组织中显著高于癌旁正常组织，与前列腺癌GS评分和肿瘤病理分期有关。 ACAT1可能是早期前列腺癌的标志。
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酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1对BCG诱导巨噬细胞自噬的调控作用
目的 探讨酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(Acyl-CoA:cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)对卡介苗(BCG)感染巨噬细胞后胞内胆固醇水平及细胞自噬的调控作用.方法 BCG感染RAW264.7巨噬细胞不同时间后,采用qRT-PCR法检测ATAC1基因mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法检测ATAC1及自噬相关蛋白LC3Ⅱ/I、Beclin1的表达水平,胆固醇定量检测试剂盒检测胞内胆固醇及胆固醇酯的变化,油红O染色法检测细胞内脂滴的含量,以感染0h的细胞为对照组.结果 在BCG感染巨噬细胞后,与对照组相比,ACAT1基因mRNA的表达在感染后2、6、12h逐渐下降,12h达到低,差异极显著(P＜0.01);ACAT1蛋白的表达量随感染时间先降后升,在感染后12h表达量低,感染2h、24 h与对照组相比差异显著(P＜0.05),感染6h、12h与对照组相比差异极显著(P＜0.01);胞内游离胆固醇含量在感染后2、6、12h逐渐升高,与对照组相比差异极显著(P＜0.01);胆固醇酯含量逐渐下降,至12h低,6、12、24 h与对照组相比差异极显著(P＜0.01);胞内脂滴的数量随感染时间先降后升,且感染后12h胞内脂滴数量少.结论 结核分枝杆菌感染巨噬细胞后,ACAT1表达下调,使胞内胆固醇酯合成量下降,胆固醇积累,激活细胞自噬.
