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北京市市售贝类、蔬菜、浆果、即食海产品中诺如病毒污染状况检测及检测方法探析
目的 对北京市市售贝类(牡蛎、贻贝、扇贝、文蛤、毛蚶)、蔬菜(苗菜、生菜)、浆果(草莓、蓝莓)、即食海产品(三文鱼、即食虾)进行诺如病毒检测.方法 贝类、蔬菜、浆果类样品参照ISO/TS 15216-1方法进行前处理,虾类检测参照贝类、三文鱼参照蔬菜的方法并进行改良.病毒RNA提取参照罗氏High pure viral RNA Kit试剂盒方法对样品前处理后的提取液进行提取.实时荧光逆转录聚合酶链反应(实时荧光RT-PCR)的检测使用罗氏LightMix(R) noroviurus GⅠ-GⅡ于Lightcycler(R) 480 Ⅱ进行检测,并进行GⅠ-GⅡ分型.诺如病毒阳性样品,参照SN/T2626-2010《国境口岸诺如病毒检测方法》,使用JV12、JV13进行扩增,将获得的DNA扩增片段进行测序并分型.结果 经罗氏试剂盒检测贝类食品478份(40份阳性)、蔬菜62份(1份阳性)、浆果84份(0份阳性)和即食海产品51份(1份阳性).有42份为GⅠ-GⅡ,其中37份为GⅡ型,4份为GⅠ型.在42份阳性样品中,有29份GⅡ型阳性样品对RNA聚合酶区域扩增成功,通过序列分析,27份为GⅡ.17,1份为GⅡ.12,1份为Hawaii.calicivirus.结论 通过对北京市市售食品样品中诺如病毒检测发现,贝类食品呈现较明显的季节分布,在冬季检出率较高,贝类食品是诺如病毒污染率高的食品.
