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新疆紫草HPLC特征图谱和紫草类药材6种萘醌类成分含量测定
目的:采用高效液相色谱法建立新疆紫草药材的特征图谱,并同时测定5种紫草类药材(软紫草属新疆紫草、内蒙紫草、滇紫草属长花滇紫草、滇紫草属滇紫草、硬紫草属硬紫草)6个主要羟基萘醌色素类成分的含量,比较不同基原紫草的化学成分差异.方法:以紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β,β '-二甲基丙烯酰阿卡宁、2-甲基丁基酰紫草素为对照品,采用YMC Pack ODS-A色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05％甲酸水溶液(70∶30)为流动相,流速1 mL·min-1,检测波长275 nm,柱温30℃;采用CHEMPATTERN化学计量学软件对结果进行处理分析.结果:建立新疆紫草特征图谱,标定10个特征峰,30 min内紫草的主要色谱峰能够达到完全分离,对5种紫草类药材6个特征峰成分进行含量测定.紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β,β '-二甲基丙烯酰阿卡宁、2-甲基丁基酰紫草素质量浓度分别在2.13～1 065 μg·mL-1 (r=0.999 3,n=6)、2.01～1 004μg·mL-1(r=0.999 8,n=6)、2.05～1 026 μg·mL-1(r=0.999 7,n=6)、1.92～960μg·mL-1 (r=0.999 9,n=6)、2.00～1 001 μg·mL-1(r=0.999 8,n=6)和1.87～937μg· mL-1(r=0.999 9,n=6)范围内线性关系良好,方法的平均回收率(n=6)分别为97.6％(RSD=1.9％)、96.6％(RSD=2.2％)、97.9％(RSD=1.1％)、98.4％(RSD=1.2％)、96.2％(RSD=1.1％)和97.3％(RSD=1.7％);19批新疆紫草中上述6个羟基萘醌类成分含量分别为0.01％～0.37％、0.02％～2.42％、0.02％～1.42％、0.02％～0.98％、0.05％～1.66％和0.09％～3.15％,2批内蒙紫草中均未检出β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁.结论:所建立新疆紫草特征图谱专属性强,结合6个主要羟基萘醌类成分含量测定能够区分各基原紫草,有助于全面评价紫草的质量,为规范紫草药材的使用提供科学依据.
