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miRNA-1181抑制人胰腺癌细胞的增殖
目的:探讨miRNA-1181(miR-1181)对人胰腺癌细胞增殖能力的影响.方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-RCR)检测miR-1181在4株人胰腺癌细胞系及1株人正常胰腺上皮细胞系中的表达,选取miR-1181表达差异较明显的PANC-1和MIA PaCa-2细胞系进行后续实验;构建miR-1181过表达慢病毒载体(miR-1181U)以及空载慢病毒载体(NC),采用qRT-PCR检测感染效率;在体外采用CCK-8实验,平板克隆实验检测miR-1181对胰腺癌细胞增殖能力的影响;建立裸鼠皮下成瘤模型,用免疫组化实验检测miR-1181对胰腺癌细胞成瘤能力的影响.结果:qRT-PCR显示4株胰腺癌细胞系中miR-1181表达量低于正常胰腺上皮细胞(P＜0.05);过表达miR-1181后PANC-1和MIA PaCa-2细胞增殖能力明显受到抑制(P＜0.05),细胞集落形成数量明显减少(P＜0.05);裸鼠皮下成瘤模型显示过表达miR-1181后肿瘤体积及免疫组化指标Ki67均明显低于对照组(P＜0.05).结论:过表达的miR-1181能在体内体外抑制胰腺癌细胞的增殖,有望成为胰腺癌治疗的新靶点.
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miRNA-1181通过抑制STAT3影响人胰腺癌细胞的侵袭转移能力
目的:探讨miRNA-1181(miR-1181)对人胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响以及机制.方法:选取胰腺癌细胞系PANC-1和MIA PaCa-2进行实验并构建miR-1181过表达慢病毒载体(miR-1181U),低表达慢病毒载体(miR-1181D)以及空载慢病毒载体(NC),采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测感染效率;Tran-swell实验以及划痕实验检测miR-1181对胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响,免疫荧光检测miR-1181对细胞骨架的影响,Western bolt检测STAT3的表达;构建si-STAT3并转染miR-1181低表达组(miR-1181D),重复transwell实验验证STAT3是其靶基因.结果:qRT-PCR显示3条不同序列的si-STAT3均能显著下调STAT3的表达;Transwell实验及划痕实验显示上调miR-1181后能显著抑制胰腺癌细胞的侵袭转移(P＜0.05),下调miR-1181后能显著促进胰腺癌的侵袭转移(P＜0.05);Western blot显示miR-1181U能抑制STAT3的表达,miR-1181D能促进STAT3的表达;免疫荧光显示在PANC-1细胞中过表达miR-1181后,F-肌动蛋白(F-actin)被剪切,呈现低表达,导致其运动结构和极性的缺失,从而迁移能力变弱;si-STAT3以后能减弱miR-1181D组对侵袭转移的促进作用.结论:miR-1181可能通过抑制STAT3来抑制人胰腺癌细胞的侵袭转移能力,有望成为胰腺癌治疗的潜在靶点.
