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日照平原地区鼠类及其携带汉坦病毒调查
目的 了解日照平原地区鼠类种群、分布及鼠类携带汉坦病毒情况,指导当地流行性出血热防控工作.方法 2014年5月-2015年4月,在日照平原区域选择8个监测点,采用夹夜法和笼夜法调查,对捕获的鼠类进行鼠种鉴定,用RT-PCR方法检测鼠类携带汉坦病毒核酸.结果 共捕获鼠类167只,包括褐家鼠、小家鼠、黑线姬鼠、黑线仓鼠和臭鼩5个鼠种.野外区域平均鼠密度为1.12％,6-8月份达高峰.捕获的5个鼠种均检测到汉坦病毒核酸,存在汉城型和汉滩型混合感染情况.居民区平均鼠密度为0.11％,7-8月份达高峰,捕获的2个鼠种未检出汉坦病毒核酸.结论 日照平原野外区域鼠密度高,鼠类存在感染两个汉坦病毒型别的情况,应加强监测.
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云南省四县啮齿动物自然感染汉坦病毒及基因分型研究
目的 掌握汉坦病毒(HV)宿主动物及基因型,为肾综合征出血热(HFRS)防制提供科学依据.方法 居民区采用笼夜法捕鼠,野外采用夹夜法捕鼠,鼠肺组织样品用直接免疫荧光法检测HV抗原,用RT-PCR法检测HV核酸及分型.结果 2006年在云南省泸西、寻甸、永胜和玉龙县共捕到鼠类7属12种690只,其中居民区捕到5属6种304只,以黄胸鼠和褐家鼠为优势鼠种;野外捕到7属12种386只,以高山姬鼠为优势鼠种.检测鼠肺624份,HV抗原阳性31份,带毒率4.97%(31/624),其中居民区鼠带毒率为2.17%(6/277),带毒鼠种为褐家鼠和黄胸鼠;野外鼠带毒率为7.20%(25/347),带毒鼠种为高山姬鼠、大绒鼠、中华姬鼠和黑腹绒鼠.HV核酸阳性21份,其中汉城型阳性3份(褐家鼠1份,大耳姬鼠1份,巢鼠1份),汉滩型阳性18份,(黄胸鼠2份,高山姬鼠7份,大绒鼠7份,黑腹绒鼠1份,巢鼠1份).结论 调查地区存在以褐家鼠为主要传染源的家鼠型HFRS疫源地,也存在以高山姬鼠和大绒鼠为主要传染源的野鼠型HFRS疫源地.HTN型病毒疫源地具有多种宿主动物的分布特点.
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云南省楚雄州汉坦病毒宿主动物及分子流行病学研究
目的 掌握汉坦病毒(HV)在云南省啮齿动物中的流行情况及其遗传特征.方法 采用笼夜法捕鼠,鼠肺标本用直接免疫荧光法检测HV抗原,用RT-PCR法检测HV核酸及分型,对产物进行序列测定,用PHYLIP软件包进行系统发生分析.结果 2005-2006年在云南省楚雄州10个县(市)居民区共捕获鼠类4属8种1421只,其中褐家鼠1056只,构成比高达74.31%,其次为黄胸鼠(19.70%).检测鼠肺组织1029份,HV抗原阳性53份,总带病毒率为5.15%,带病毒鼠种为褐家鼠(5.08%,38/748))、黄胸鼠(5.97%,12/201)、大足鼠(7.69%,2/26)和斯氏家鼠(6.25%,1/16).HV汉城型(SEO)核酸检测阳性21份(褐家鼠15份,黄胸鼠4份,大足鼠2份).获得的12个病毒S片段核苷酸序列与GenBank中国SEO型病毒R22、L99和HLD65株同源性较高,为87.1%～99.7%;与汉滩型(HTN)76-118株同源性仅为64.4%～69.1%.系统进化分析显示,楚雄州12个病毒S片段核苷酸序列与SEO型亲缘关系较近,与HTN型及其他型HV相距较远,证实这12份病毒标本均为SEO型病毒,并可分S1和S3两个亚型.结论 首次证实楚雄州10个县(市)广泛存在以褐家鼠为主要传染源的HFRS家鼠型疫源地及SEO型病毒的流行.分析发现SEO型不同亚型病毒的分布有其地域特点和独立性.
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汉坦病毒浙江分离株ZT71株的全基因核苷酸序列测定及分析
目的 为了获得浙江省汉坦病毒基因组更为详尽的资料,研究汉坦病毒的进化状况及变异程度,为疫苗病毒株的选择使用提供科学依据.方法 设计特异性引物,RT-PCR分段扩增ZT71株全长L、M和S片段,PCR产物纯化后克隆于T载体并进行序列测定.然后进行遗传进化分析.结果 汉坦病毒ZT71株L、M及S基因分别由6530、3651和1753个核苷酸组成,分别编码2151、1133和429个氨基酸.基因比较分析表明,ZT71株与SEO型汉坦病毒比较其L片段核苷酸同源性为95.5%～99.7%,氨基酸同源性为99.0%～99.3%;M片段核苷酸同源性为84.1%～99.6%,氨基酸同源性为95.3%～99.2%;S片段核苷酸同源性为88.7%～99.5%,氨基酸同源性为96.5%～99.1%;而与其他汉坦病毒同源性则较低.结论 测定了ZT71株的全基因核苷酸序列,其L、M和S片段具有和其他汉坦病毒L、M、S片段相似的核苷酸一级结构,但与SEO型更为接近,属于SEO型病毒.
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青岛市流行性出血热的汉坦病毒检测和其基因型的研究
目的 探讨引起青岛市流行性出血热的汉坦病毒(Hantavirus,HV)的感染类型,以明确基因亚型和进化特点.方法 免疫胶体金法检测126份临床怀疑急性期病人血清中汉坦病毒的抗体.RT-PCR 扩增病毒的S 基因段,并经测序获得基因序列.病毒的核苷酸序列分析和构建系统进化树应用DNASta软件,并以确定病毒的型别.结果 126份血清标本中,112份汉坦病毒IgM和(或)IgG抗体阳性.经RT-PCR 扩增获得7株汉坦病毒S基因序列,与汉滩型(Hantaan virus,HTN)和汉城型(Seoul virus,SEO)毒株比较,其中2株为HTN型,5株为SEO型,相互间序列达到68%-98.9%同源性.结论 引起青岛市流行性出血热的汉坦病毒为汉滩型和汉城型的混合感染,以汉城型为主.
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一株汉城型汉坦病毒的分离及基因鉴定
目的 从鼠肺中获得汉坦病毒分离株并进行基因鉴定与分型,为地区分离株特性研究提供基础.方法 用Vero-E6细胞分离病毒,进行荧光和RT-PCR鉴定,之后对目的 片段进行序列测定和分析.结果 从褐家鼠鼠肺中分离到一株汉坦病毒,编号SC106.用汉城型(SEO)汉坦病毒M基因特异性引物检测得到预计大小的片段,此片段的核苷酸序列分析表明,SC106与SEO型参考毒株的同源性较高,均在94%以上;与汉滩型(HTN)参考毒株的同源性较低,均在67%以下.进化树分析表明SC106位于SEO型所在的支系.结论 SC106为SEO型汉坦病毒.
